SN_T 4584-2016出口动物源性食品中沃尼妙林和泰妙菌素残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4584--2016出口动物源性食品中沃尼妙林和泰妙菌素液相色谱-质谱／质谱法残留量的测定Determination of valnemulin and tiamulin residues in foodstuffs ofanimal origin for export---LC-MS/MS method2017-03-01 实施2016-08-23 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4584--2016前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出境检验检疫局。本标准主要起草人：刘晓茂、李学民、常巧英、王飞、葛娜、杨志伟、张守军、曹彦忠、张进杰。 SN/T 4584---2016出口动物源性食品中沃尼妙林和泰妙菌素残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了出口动物源性食品中沃尼妙林和泰妙菌素残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于动物肌肉组织、肝脏、鱼、蛋和奶中沃尼妙林和泰妙菌素残留量的定量测定和定性确证。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要用乙腈提取试样中的沃尼妙林和泰妙菌素残留，经MCXSPE小柱净化，C18色谱柱分离，以电喷雾离子源（ESI)正离子扫描方式，在多反应监测（MRM)模式下进行测定，外标法定量。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为优级纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1甲醇：色谱纯。4.2乙腈：色谱纯。4.3甲酸。4.4正已烷。4.5氨水:25%。4.6氯化钠。4.7无水硫酸钠：650℃灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。4.8甲酸-水（1十19，体积比）：取5mL甲酸（4.3)用水定容至100mL。氨水-甲醇（1+19，体积比）：取5mL氨水（4.5)用甲醇（4.1）定容至100mL。4.94.10乙睛-水（1+3，体积比）：取25mL乙腈（4.2)用水定容至100mL。4.11标准物质：沃尼妙林（CAS号：101312-92-9）；纯度大于或等于98%；泰妙菌素（CAS号：55297-955）;纯度大于或等于98%。4.12沃尼妙林标准贮备溶液：1.0mg/ml。称取适量的沃尼妙林标准物质，用甲醇溶解并配制成1.0 mg/mL的标准贮备液。避光保存于一18℃冰柜中。4.13泰妙菌素标准贮备溶液：1.0mg/mL。称取适量的泰妙菌素标准物质，用甲醇溶解并配制成1.0mg/mL的标准贮备液。避光保存于一18℃冰柜中。4.14沃尼妙林和泰妙菌素混合标准工作溶液：1.0ug/mL。吸取适量沃尼妙林标准贮备溶液（4.12)和 SN/T 4584—2016泰妙菌素标准贮备溶液（4.13），用乙睛-水（4.10）稀释成1.0μg/mI的标准工作溶液，4℃冷藏避光保存。4.15MCX固相萃取小柱：60mg,3 mL,或相当者。4.16微孔滤膜：0.22μm,水相。5仪器5.1高效液相色谱-串联质谱仪，配有电喷雾离子源（ESI）5.2分析天平：感量分别为0.01mg和0.01g。5.3均质器:15 000 r/min。5.4振荡器。5.5离心机:10 000 r/min。135.6旋转蒸发器。5.7固相萃取装置。5.8真空泵：真空度应达到80kPa。6试样的制备与保存6.1动物肌肉组织、肝脏、鱼从原始样品取出有代表性样品约500g，用组织捣碎机充分捣碎混匀，装人洁净容器内，密封作为试样，注明标记。将试样于一18℃冷冻保存。试样在制备和保存过程中避免受到污染或待测物含量发生变化。6.2 蛋从原始样品取出有代表性样品约500g，去壳后用组织捣碎机充分混匀，装人洁净容器内。密封作为试样，注明标记。将试样置于4℃冷藏避光保存。试样在制备和保存过程中避免受到污染或待测物含量发生变化。6.3奶从原始样品取出有代表性样品约500g，充分混匀，装人洁净容器内。密封作为试样，注明标记。将试样置于4℃冷藏避光保存。试样在制备和保存过程中避免受到污染或待测物含量发生变化。7 测定步骤7.1提取7.1.1动物肌肉组织、肝脏和鱼称取2g（精确至0.01g)样品至离心管中，加人5g无水硫酸钠（4.7）、10mL乙腈，用均质器于10 000 r/min速率下均质2min，振荡10 min，以4000 r/min离心10 min。上层清液转移至鸡心瓶中，用10 mL乙睛重复上述提取、离心操作，合并两次提取的上清液,在40℃下浓缩至近干,用5 mL甲酸-水（4.