NYT 946-2006蒜薹、青椒、柑橘、葡萄中仲丁胺残留量的测定.pdf

ICS 65.100.01B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 946—2006蒜墓、青椒、柑橘、葡萄中仲丁胺残留量测定Determination of sec-butylamine residues in garlic sproutgreen pepper orange and grape2006-01~26 发布2006-04-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 946—2006前 言本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：沈阳农业大学、辽宁省乡镇企业信息咨询服务中心。本标准主要起草人：纪淑娟、马岩松、吴玥、杨洪嘉、车芙蓉、何晓晗、李江阔。I NY/T 946—2006蒜蔓、青椒、柑橘、葡萄中仲丁胺残留量测定1 范围本标准规定了蒜蒸、青椒、柑橘、葡萄中仲丁胺(2-AB)残留量的检测方法。本标准适用于蒜、青椒、柑橘、葡萄中仲丁胺残留量的测定，其他果品蔬菜中仲丁胺残留量的测定可参照本标准。本方法的最低检出限量为0.672mg/kg,测定浓度范围为0.672mg/kg~20.000mg/kg。2原理通过水蒸气蒸馏,将样品中仲丁胺和其他挥发性胺类分离，用四氯化碳(CCl4)洗涤，除去干扰物质，在硼砂缓冲液中 2-AB与 2,4-二硝基氟苯(DNFB)反应,生成 N-仲丁基-2,4-二硝基苯胺(BDNA),加碱水解除去多余试剂，用环已烷萃取BDNA，经薄层色谱分离、净化，将2-AB色斑用三氯甲烷溶脱，用紫外/可见分光光度计在332 nm处测定。3 试剂与材料除非另有说明,所用的试剂均为分析纯，所用的水均为无离子水。3.1氧化镁固体3.2无水硫酸钠3.3正已烷3.4 乙醚3.5三氯甲烷3.6四氯化碳3.7 苯3.81,4-二氧六环3.91 mol/L氯化钙溶液称取氯化钙(CaCl²)110.9 g,溶于水中,定容至 1000 mL。3.100.05mol/L四硼酸钠精确称取四硼酸钠 19.07g,溶于蒸馏水,定容至1000mL。3.11 0.2 mol/L 硼酸精确称取硼酸 12.37 g,溶于蒸馏水,定容至 1000 mL.3.12 硼酸盐缓冲液将硼砂溶液与硼酸溶液按8+2比例混合制成硼酸盐缓冲液。3.132 mol/L氢氧化钠溶液推确称取 8.00g氢氧化钠(NaOH),溶解定容于 100mL蒸馏水。3.140.3mol/L氢氧化钠溶液推确称取 1.20g氢氧化钠(NaOH),溶解定容于 100mL蒸馏水。3.150.05mol/L碳酸钠溶液准确称取 5.30g碳酸钠(NazCOs),溶解定容于1000mL蒸馏水。1 NY/T 946—20063. 160. 15 m0l/L 硫酸溶液准确吸取9mL硫酸(H2SO4),溶解定容于1000 mL蒸馏水。3.17 2,4-二硝基氟苯(DNFB)在 50mL蒸馏后的 1,4-二氧六环中溶解0.75mL.2,4-二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene)(简称DNFB)(当天配制)。3.18环已烷将500mL环已烷通过长125mm、直径25mm、填充粒径为0.2mm～0.5mm硅胶的层析柱层析，弃去开始的 25mL,其余收集于干燥洁净的试剂瓶中。3.19仲丁胺标准溶液(100 μg/mL)精确吸取 14μL标准仲丁胺原液,用蒸馏水定容至 100 ml。3.20仲丁胺标准使用液(100 μg/mL)精确吸取上述仲丁胺标准溶液10mL,用蒸馏水定容至 100 mL。4仪器4.1高速电动组织捣碎机；4.2恒温水浴锅(60℃±2℃);4.3水蒸气蒸馏装置；4.4薄层板：硅胶G(0.25mm);4.5紫外-可见分光光度计；4.6旋转蒸发仪。5操作方法5.1样品处理将果蔬样品切成小块，用组织捣碎机捣成浆状,称取 50g匀浆,精确到0.1g,置于800mL蒸馏瓶中,依次加人75mL1 mol/LCaClz溶液、10gMgO与50mL水制成的浆状物,并用 100mL水冲洗瓶壁,转动使之混合均匀。将蒸馏瓶连到水蒸气蒸馏装置上进行蒸馏，用装有10mL0.15moi/LHzSO4溶液的带刻度的 100 mL 烧杯接收馏出液约 80 mL,再用 0.3mol/L NaOH 溶液将蒸馏液调到 pH=7(用 pH计）,最后用蒸馏水定容至100mL备用。5.2标准工作曲线的绘制5.2.1 吸取仲丁胺标准使用液(3.19)0.0mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL、6.0mL、8.0mL,和10.0mL（相当于 0.0 μg、10.0 μg、20.0 μg、40.0 μg、60.0 μg、80.0 μg、100.0μg),分别置于 50 mL具塞锥形瓶中,蒸馏水至 10 mL。5.2.2分别加人5mL硼酸盐缓冲液和2mL DNFB试剂,置60℃水浴反应30m