第6章糖代谢与控制.pptVIP

当前第30页\共有66页\编于星期三\8点 ⑶选育L-Trp缺陷、L-Tyr缺陷、L-Phe缺陷、CoQ缺陷、维生素K缺陷或叶酸缺陷突变株。 原理同莽草酸缺陷突变株。 当前第31页\共有66页\编于星期三\8点 3、其它标记 据报道，在维持转酮酶缺陷的情况下，进一步诱变，使菌体带上具有高葡萄糖脱氢酶活性和丧失孢子形成能力等标记，可使菌体的D-核糖积累量大幅度提高。 葡萄糖脱氢酶是芽孢杆菌属细菌的孢子所特有的酶，该酶由于NAD、NADP和NADH2、NADPH2会发生分子型的变换，结果在菌体对数生长期被诱导，导致D-核糖的大量积累。 当前第32页\共有66页\编于星期三\8点 4、利用基因工程技术构建核糖工程菌株 岩盾等人将枯草芽孢菌染色体DNA中的转酮酶基因克隆到载体质粒pUB110中，再将氯霉素酰基转移酶基因插入到转酮酶基因之中，造成转酮酶基因的不可逆失活。经限制性内切酶酶切后得到线状重组质粒，将该重组质粒转化到枯草芽孢杆菌宿主中，构建出转酮酶失活的D-核糖工程菌株，其D-核糖积累量达52g/L。 当前第33页\共有66页\编于星期三\8点 小林等人将葡萄糖脱氢酶基因克隆到穿梭载体质粒pHY300PLK中，然后转化到枯草芽孢杆菌中，构建出D-核糖工程菌株，能积累49g/L D-核糖。 当前第34页\共有66页\编于星期三\8点 5、发酵控制 D-核糖的