SNT 2524.1-2010进出口食品中变形杆菌检测方法 第1部分：定性检测方法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2524.12010进出口食品中变形杆菌检测方法第1部分：定性检测方法Determination of Proteeae species in food for import and export-Part 1 :Qualitative method2010-03-02 发布2010-09-16 实施中华人民共和国徐层技016查询真！发布数码防伪国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2524.1—2010前言SN/T2524《进出口食品中变形杆菌检测方法》分为两部分：第1部分：定性检测方法；第2部分：MPN方法。本部分为SN/T 2524的第1部分。本部分的附录 A为规范性附录。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、中华人民共和国厦门出入境检验检疫局。本部分主要起草人：蒋鲁岩、郭桂萍、陈双雅、徐邦兴、高洁湘、蒋原、薛峰、祝长青、陈国强。本部分系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 2524.1--2010进出口食品中变形杆菌检测方法第1部分：定性检测方法1范围SN/T 2524的本部分规定了乳与乳制品、肉与肉制品、水产品、蔬菜、蛋制品等5大类食品中变形杆菌的检测方法。本部分适用于食品中普通变形杆菌、奇异变形杆菌、摩根摩根氏菌产碱普罗菲登斯菌的检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过SN/T2524的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。SN/T1538.1培养基制备指南第1.部分：实验室培养基制备质量保证通则SN/T 1538.2培养基制备指南.第2部分:培养基性能测试实用指南3定义下列术语和定义适用于SN/T2524的本部分3. 1Proteus变形杆菌变形杆菌簇(Proteeae)的细菌统称为变形样菌。它们是有劫力的革兰氏阴性杆菌，分为三个独立·自前报道的引起食物中毒的变形杆菌有普通变形的菌属，即变形杆菌属、摩根氏菌属和普罗菲登斯菌。杆菌、奇异变形杆菌、产碱普罗菲澄登斯菌和摩粮摩根氏菌。4设备与材料4. 1冰箱：-20℃～4℃4.2恒温培养箱：36℃±1℃。4.3天平:0 g～500 g,感量 0.5 g。4.4均质器。4.5均质袋。4.6灭菌三角烧瓶：500mL,250mL。4.7灭菌培养Ⅲl:直径 90 cm。4.8显微镜:10×～100×。4.9灭菌刀、剪子、镊子。质控菌株：普通变形杆菌 ATCC 13315T、奇异变形杆菌 ATCC 29906T、摩根摩根氏菌4.10ATCC25830T、产碱普罗威登斯菌ATCC 9886T或类似菌株。4.11API20E肠杆菌和其他革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒或类似产品。VITEK全自动微生物分析系统或类似设备。4. 121 SN/T 2524.1-20105培养基及试剂5. 1肠杆菌增菌肉汤(EE肉汤）：见附录A中第 A.1章。5.2革兰氏阴性菌增菌液(GN 增菌液）:见附录 A 中第 A.2章。5.3沙门氏菌和志贺氏菌琼脂（SS琼脂）：见附录 A中第 A.3章。5. 4伊红美兰琼脂(EMB琼脂）：见附录 A中第 A.4章。5.5麦康凯琼脂（MAC琼脂）：见附录 A 中第 A.5章。5.6苯丙氨酸琼脂斜面：见附录 A 中第 A.6 章。5.7革兰氏染色液:见附录 A中第 A.7章。5.8培养基和试剂的配制遵循SN/T1538.1和SN/T1538.2的要求。6方法提要与流程6.1方法提要本方法采用增菌培养和分离鉴定的方法对变形杆菌进行定性检测。6.2检测流程检测流程图见图 1。样品25g（mL）+225mLBPW36℃±1℃，8h～18h1mL+10 mL GN增菌液或EE肉汤36℃±1℃，18h～24hEMB琼脂SS琼脂或MAC琼脂36℃±1℃，18 h～24h挑取可疑菌落苯丙氨酸脱氨酶阳性、革兰氏阴性杆菌非左述情况其他生化实验，API20E鉴定试剂盒或非变形杆菌VITEK全自动微生物分析系统报告结果图 1 变形杆菌检测流程图2 SN/T 2524.1—20107 检测步骤7.1前增菌称取25g(mL)样品，放人盛有225mLBPW的无菌均质杯中，以8000r/min～10000r/min均质1 min～2 min,或置于盛有 225 mL BPW 的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打 1 min～2 min,若样品为液态,不需要均质，振荡均匀。如需要，测定 pH 值，用 1 mol/L无菌氢氧化钠或盐酸调 pH 值至6.8±0.2。无菌操作,将样品转至500mL锥形瓶中，如