SN_T 2985-2011马流行性感冒检疫技术规范.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2985—2011马流行性感冒检疫技术规范Quarantine protocol for eguine influenza2011-09-09 发布2012-04-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局K数码防伪 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准马流行性感冒检疫技术规范SN/T 2985--2011*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 www. spc. net. cn电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本 880×1230 1/16印张 0.755字数13千字2012年3月第版反　2012年3月第一次印刷印数 1—1600*书号：155066·2-22964 SN/T 2985—2011前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准与OIE《陆生动物诊断试验和疫苗标准手册》2008第2.5.7章一致性程度为非等效。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国北京出入境检验检疫局、中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本标准主要起草人：柏亚铎、汪琳、史喜菊、孟庆峰、刘艳华、张伟、王伟利、董志珍、张利峰、方绍庆、韩晶。1 SN/T 2985—2011马流行性感冒检疫技术规范1 范围本标准规定了马匹中马流行性感冒抗原及抗体检测的样品处理、实验步骤及结果的判定。本标准适用于对马匹进行马流行性感冒检疫。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。瓦是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。SN/T1687马流感血凝抑制试验操作规程3术语、定义和缩略语3.1术语和定义下列术语和定义适用于本文件3.1.1eguine influen马流感病毒马流行性感冒的病原，属正粘病科A型流感病毒属，分为H7N7种H3N8两个亚型。3.2缩略语下列缩略语适用于本文件。EI:马流感EIV:马流感病毒PBS:磷酸盐缓冲盐水HA:血凝试验HI:血凝抑制试验HAU:血凝单位4临床诊断4.1. 发病症状马流行性感冒是由正粘病毒科 A型流感病毒属中两个抗原性不同的 A型流感病毒亚型（H7N7,曾称为马-1型；H3N8，曾称为马-2型)所引起的一种急性呼吸道疾病。易感马发病时，临床症状表现为发热、刺耳的干咳、鼻流粘性脓性分泌物；有一定免疫力马发病时，上述这些症状可能不会全部表现出来。1 SN/T 2985—20114.2 病理变化4.2.1病理剖检变化眼观病变为结膜潮红、水肿、外翻，呈砖红色或淡黄色，常出现角膜浑浊。上呼吸道粘膜充血、水肿和渗出，上皮细胞脱落与局灶性糜烂。头、颈部淋巴结肿大。肺脏充血、水肿，扩张不全。肝脏一般无明显眼观病变。4. 2. 2病理组织学变化表现为急性支气管炎与细支气管炎，以管腔内有多量嗜中性粒细胞渗出为主要特征。炎症为一过性，一般只见于发病后的头 4d,其后炎症消退，粘膜内遗留有轻度淋巴细胞，浆细胞浸润。炎症也可转变为慢性支气管炎与细支气管周围炎，间质性肺炎。严重的病例为急性支气管间质性肺炎，表现为肺泡中普遍增厚，增生的细胞为组织细胞与淋巴细胞。肺泡腔和支气管腔内有浆液（少数为纤维素）、嗜中性粒细胞、巨噬细胞与淋巴细胞性渗出物，支气管周围还有明显的淋巴细胞，浆细胞浸润，肺泡上皮呈立方状化生。肝脏可发现肝窦状隙内有弥散性或结节性淋巴细胞、组织细胞浸润。4.3 流行病学自然条件下，只有马属动物具易感性，没有年龄、性别和品种差别。病马咳嗽喷出含有病毒的飞沫，经呼吸道传染是本病主要的传染方式。实验证明，此病可通过空气感染，也可通过污染的饲料、饮水经口感染。因为病毒在康复马匹的精液中存在很久，配种，尤其是本交也是此病的一种重要传播方式。本病传播极为迅速，引进易感畜群，呈暴发性流行，经1周或稍多些时间，所有易感马都感染发病。本病一年四季均可发生，我国北方地区以春秋多发。有些地区则多发生于冬末春初，而另一些地区则流行于夏季。5 实验室诊断5.1病原分离鉴定5. 1. 1 鸡胚病毒分离 设备孵化器、台式离心机、旋涡振荡器、冰箱。5. 1. 1. 2材料和试剂.1采样用：棉拭子、剪刀、镊子、注射器、1.5mL离心管、研钵。采样工具应经121℃士2℃，15min高压灭菌并烘干；pH7.2,0.01mol/LPBS配制方法见附录A;青霉素、链霏素。.2鸡胚接种用：照蛋器、打孔器、酒精灯;pH7.2,0.01mol/LPBS配制方法见附录A;5%碘;70%酒精;1.0 mL一次性灭菌注射器;石蜡;9 日龄～11 日龄 SPF鸡胚。菜样和送检.1在临床症状出现后立即