NY_T 3159-2017水稻白背飞虱抗药性监测技术规程.pdf

ICS 65.020.01B 20NY中华人民共和国农业行业标准NY/T3159—2017水稻白背飞虱抗药性监测技术规程Technical code of practice for insecticide resistance monitoring ofSogatella furcifera(Horvath)2017-12-22 发布2018-06-01实施中华人民共和国农业部-发布 NY/T3159—2017前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、南京农业大学、广西农业科学院水稻研究所。本标准主要起草人：张帅、高聪芬、龙丽萍、吴顺凡、张巍、凌炎I NY/T3159—2017水稻白背飞虱抗药性监测技术规程1范围本标准规定了稻茎浸渍法对水稻白背飞虱［Sogatellafurcifera（Horvath)］抗药性的监测方法本标准适用于水稻白背飞虱对常用杀虫剂的抗药性监测。2试剂与材料2.1生物试材试虫：白背飞虱Sogatellafurcifera（Horvath）。供试植物：未接触任何药剂处理的感虫水稻品种，如汕优63或TN1等。2.2试验药剂原药。2.3试验试剂TritonX-100(或吐温80)；丙酮(或二甲基甲酰胺）;所用试剂为分析纯。3仪器设备3.1电子天平：感量0.1mg。3.2塑料杯：容量550mL，上口直径7cm，下口直径6cm，高15cm。3.3培养杯：直径7cm，高20cm。3.4移液管。3.5容量瓶。3.6量筒。3.7烧杯。3.8吸虫器。3.9移液器。4试验步骤4.1试材准备4.1.1试虫准备试虫采集选当地具有代表性的稻田（如不同品种）3块～5块，每块田至少随机选取5点采集生长发育较一致的白背飞虱成虫或若虫，每地采集虫量1000头以上，供室内饲养。试虫饲养大田采集的成虫或若虫在室内扩繁1代～2代，测试代（F或F2）于7d龄水培水稻苗饲养至3龄中期若虫供抗药性监测，饲养条件为（27士1)℃、湿度（75士5)%、光照周期16h：8h(L：D)。4.1.2试验水稻准备稻茎连根挖取分藥至孕穗初期、长势一致的健壮、无虫稻株，洗净，剪成10cm长的带根稻茎，于阴凉处1 NY/T3159—2017晾至表面无水痕，供测试用。4.2药剂配制在电子天平上用容量瓶称取一定量的原药，用丙酮等有机溶剂（吡蚜酮用二甲基甲酰胺)溶解，配制成一定浓度的母液。用移液管或移液器吸取一定量的母液加人塑料杯中，用含有0.1%TritonX-100（或0.1%的吐温80)的蒸馏水稀释配制成一定质量浓度的药液供预备试验。根据预备试验结果，按照等比梯度设置5个～6个系列质量浓度。每质量浓度药液量不少于400mL，盛装于550mL的塑料杯中，用于稻茎浸渍。用不含药剂的溶液作空白对照。4.3处理方法4.3.1浸药将供试稻茎在配制好的药液中浸渍30S，取出晾干，用湿脱脂棉包住根部保湿，置于培养杯中，每杯3株。按试验设计剂量从低到高的顺序重复上述操作，每处理设置3次以上重复。4.3.2接虫与培养用吸虫器将试虫移入培养杯中，每杯20头，杯口用纱布或盖子罩住，在温度为（27士1)℃、相对湿度为（75士5）%、光周期16h：8h(L：D)条件下饲养和观察。4.4结果检查于处理后2d(有机磷酸酯类、氨基甲酸酯类及拟除虫菊酯类)、4d(氯化烟酰类和苯基吡唑类）、5d（昆虫生长调节剂类)或7d(吡啶甲亚胺杂环类)检查并记录存活虫数。5数据统计与分析5.1计算方法根据调查数据，计算各处理的校正死亡率。按式（1）和式（2）计算，计算结果均保留到小数点后2位：Pl=NK×100(1)..N式中：P1——死亡率，单位为百分率（%）；N——表示处理总虫数，单位为头；K——表示存活虫数，单位为头。P.-P×100...(2)P2= 100-P。式中：P2——校正死亡率，单位为百分率（%）；P，一一处理死亡率，单位为百分率（%）；P。一一空白对照死亡率，单位为百分率（%）。若对照死亡率5%，无需校正；对照死亡率在5%～20%，应按式（2）进行校正；对照死亡率20%，试验需重做。5.2统计分析采用POLO-Plus等统计分析软件进行概率值分析，求出每个药剂的LC5o值及其95%置信限、斜率(b值)及其标准误。6抗药性水平的计算与评估6.1白背飞虱对部分杀虫剂的敏感性基线参见附录A。2 NY/T3159—20176.2抗性倍数的计算根据敏感品系的LCso值和测试种群的LCso值，按式(3)计算测试种群的抗性倍数。TRR =(3)S式中：RR测试种群的抗性倍数；T 测试种群的LC5o值；S敏感品系的LC50值。6.3抗药性水平的评估根据抗性倍数的计算结果，按照表1中抗药性水平的分级标准，对测试种群的抗药