SN_T 5117-2019进出口食用动物、饲料 链霉素类（链霉素、二氢链霉素）药物残留测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

ICS 67.120B 45SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 5117—2019进出口食用动物、饲料链霉素类（链霉素、二氢链霉素）药物残留测定液相色谱-质谱／质谱法Determination of streptomycin, dihydrostreptomycin residues in live animals andfeeds for import and export - LC-MS/MS method2019-09-03 发布2020-03-01实施中四海西出版社有限公司HG944440014969中华人民共和国海关总署发布uistSkA刮开涂层 激活密码 SN/T 5117--2019前言本标准按照 GB/T1.1---2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国大连海关、沈阳农业大学。本标准主要起草人：徐静、孙兴权、苏明明、田宏哲、杨璐、李一尘、肖珊珊、代弟、曹际娟。 SN/T 5117—2019进出口食用动物、饲料链霉素类（链霉素、二氢链霉素）药物残留测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了链霉素、二氢链霉素药物残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于猪、牛、羊、兔、鸡血清及猪、牛、羊、兔尿液，以及玉米粉、小麦粉、高粱粉饲料中链霉素、二氢链霉素药物残留量的测定和确证。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试样中残留的链霉素、二氢链霉素经混合提取液提取，HLB固相萃取柱净化,经水淋洗、甲醇洗脱，定容后供液相色谱-质谱/质谱法测定，外标法定量。4试剂与材料4.1乙腈：高效液相色谱纯。4.2甲酸：高效液相色谱纯。4.3甲醇：高效液相色谱纯。4.4磷酸二氢钾(KH2PO4）。4.5三氯乙酸。4.6盐酸(HCI)。4.7氢氧化钠(NaOH)。4.8氨水(NH·H²O)。4.9乙二胺四乙酸二钠盐（Na²·EDTA）。4.10提取液：10mmol/L磷酸二氢钾溶液（含0.4mmol/L乙二胺四乙酸和2%三氯乙酸），称取2.72g磷酸二氢钾（4.4）,加人2L水，用1mol/L盐酸溶液调节pH值为4.0,再加人0.3g乙二胺四乙酸二钠盐（含2个结晶水)（4.9)和40g三氯乙酸（4.5），混匀即可。4.110.1%甲酸水溶液：取1.0mL甲酸(4.2)溶于1L水中即可。4.12链霉素标准物质：CAS号57-92-1，纯度98.0%。4.13双氢链霉素标准物质：CAS号128-46-1,纯度99.0%。4.14标准储备溶液的配制：分别准确称取适量的标准物质，用水配制成100μg/mL的标准储备溶液，1 SN/T 5117--2019置于一4℃避光保存,有效期1个月。4.15混合标准溶液的配制：取适量标准储备溶液（4.14)至100 mL容量瓶中，用水定容至刻度，配制成混合标准溶液，各组分浓度均为 1 μg/mL。4 ℃避光保存,有效期5 d。4.16标准工作溶液的配制：根据需要，吸取一定量的混合标准溶液（4.15），用空白基质提取液稀释至所需浓度，临用现配。4.17HLB固相萃取柱或相当者：60 mg,3mL。使用前依次用 3 mL甲醇（4.3）、5 mL 超纯水预洗活化。4.18 滤膜:0.22 μm,水相。4.19水:GB/T 6682规定的一级水。5仪器和设备5.17高效液相色谱串联二级质谱仪：配有电喷雾离子源(ESI)。5.2　电子天平：感量分别为0.01g、0.0001g。5.3离心机:振速8 500 r/min 以上。5.4涡旋振荡器。5.5氮吹仪。5.6固相萃取装置。5.7pH计.5.810 mL塑料离心管。6试样的制备与保存6.1试样制备无菌采集待检动物非抗凝血（≥8 mL），分离血清于洁净容器内作为试样，加封并标明标记。尿液样品（≥5mL)装入洁净容器内加封并标明标记。饲料样品(≥500g)经粉碎机粉碎，过20目筛，混匀，密封，作为试样，标明标记。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。6.2试样保存血清和尿液样品于一20℃以下条件下保存。饲料样品于常温下保存。7测定步骤7.1提取称取约2g（精确至0.01g)样品于50mL具塞离心管中，准确加入8mL提取液（4.10），涡旋振荡提取 3min后，8500 r/min离心5 min，倾出上清液。重复提取一次，合并上清液。上清液用氨水（4.8）调至 pH 3~～4,待净化。7.2　净化将提取液转移到已活化的 HLB固相萃取柱(4.17），流速控制在1d/s左右，用3mL 水淋洗,弃去