SN_T 3523-2013化学品 鱼类雌激素、雄激素和芳香酶抑制活性试验方法.pdf

SNy中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3523—2013化学品鱼类雌激素、雄激素和芳香酶抑制活性试验方法Chemicals-Fish assay for oestrogenic and androgenic activity,and aromatase inhibition2013-03-01发布2013-09-16实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T3523—2013目次前言TT引言IV1 范围2术语和定义方法局限性说明34测试原理15测试可接受性标准6方法描述6.1仪器6.2 水.6.3测试溶液6.4鱼的饲养6.5预暴露和鱼的选择7测试设计7. 1一般说明7. 2测试浓度的选择8试验过程8.1受试鱼的选择与称量--.8.2暴露条件8.2.1时间8.2.2饲养8.2.3灯光和温度8.3分析检测和测量的频率J8.4观察一般说明.2存活率.8.4.3行为和表观8.4.4鱼的人道处死8.4.5第二性特征的观察8.4.6卵黄蛋白原(VTG)9数据和报告9.1采用方差分析（ANOVA）对生物标志物响应进行评价9.2测试结果报告 SN/T 3523—201310对于测试结果的解释和接受8附录A（资料性附录）0卵黄蛋白原分析的样品收集的推荐程序附录B（资料性附录）检测特定内分泌活性物质对黑头呆鱼和青的第二性特征的评估18+.--附录C（资料性附录）鱼类内分泌筛选测试实验条件·23附录D（资料性附录）斑马鱼和黑头呆鱼的产卵基板·2527附录E（资料性附录）可接受的稀释水的一些化学特性28附录F（资料性附录）卵黄蛋白原加强样品和分析方法间参比标准附录G（资料性附录）统计分析流程2930参考文献Ⅱ SN/T 3523—2013前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准参考了经济合作与发展组织（Organization forEconomicCooperation andDevelopment，OECD)TG230：《21天鱼测试：雌激素、雄激素和芳香酶抑制活性短期筛选测试》21-dayFishAssay：AShort-Term Screening for Oestrogenic and Androgenic Activity,and Aromatase Inhibition)(英文版)。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：程艳、崔媛、陈会明、谢文平、马萍。Ⅲ SN/言环境水平的化学物质与内分泌系统相互作用，危害人类和野生动物，故需要发展和验证鱼类检测内分泌干扰活性物质的技术和方法。1998年，OECD开始着手修订已有测试指南，并发展新的测试指南，以筛选和检测潜在的内分泌干扰物。其中一项重要研究内容就是发展鱼类内分泌干扰测试方法指南。21天鱼类内分泌干扰筛选测试（TG230）经过了广泛的验证试验，包括针对选定的化学物质，在三种鱼种系（黑头呆鱼、日本青和斑马鱼）生物模型上，多个实验室间进行的有关雌激素和芳香酶抑制物质（[1]～[5])测试的方法相关性和可靠性分析测试；雄激素测试可在黑头呆鱼和青模型上进行，但不能在斑马鱼模型上进行。测试指南（TG230)不适用于测试抗雄激素物质。验证工作已由测试方法指南组国家协调机构（theNational Coordinatorsof theTestGuidelineProgramme）指定的专家组完成[6]。本测试并不识别荷尔蒙干扰的特定机制，因为受试动物拥有完整的下丘脑-垂体-性腺（HPG)轴，会对影响HPG轴的物质产生不同程度的反应。鱼类短期生殖毒性测试（TG229）包括黑头呆鱼生育力和（在适当的情况下）性腺组织观察，以及在本测试（TG230)中所包括的所有测试终点。TG229提供了对通过不同机制（包括内分泌特征）影响生殖能力的化学物质的筛选方法。这一点在选择最合适的测试指南时，优先考虑。本测试方法描述了一种体内筛选测试方法，性成熟的雄鱼和处于产卵期的雌鱼放在一起，在其生命周期中暴露于化学品一段有限的时间（21天）。在21天暴露期结束时，根据所用物种，在雄性和雌性鱼上对一种或两种生物标志物终点进行测试，作为测试化学物质的雌激素，芳香酶抑制或雄激索活性指标。这些测试终点包括卵黄蛋白原和第二性特征。对黑头呆鱼、日本青和斑马鱼可进行卵黄蛋白原测试，而第二性特征只能在黑头呆鱼和日本青上测试。此生物测试作为特定内分泌干扰模式的体内筛选测试，其应用可在“OECD内分泌干扰化学物质测试和评价框架”中看到。1 SN/T3523—2013化学品鱼类雌激素、雄激素和芳香酶抑制活性试验方法1范围本标准规定了化学品对鱼类雌激素、雄激素和芳香酶抑制活性试验方法的方法局限性说明、测试原理、测试可接受