WST 65-1996尿中杀虫脒及对氯邻甲苯胺的分光光度测定方法.pdf

中华人民共和国卫生行业标准尿中杀虫胖及对氯邻甲苯胺的分光光度测定方法WS/T65-1996Urine-Determination of chlor dimeform and4-chloro-o-toluidine-Spectrophotometric method1主题内容与适用范围本标准规定了尿中杀虫及对氯邻甲苯胺的分光光度测定方法。本法最低检测浓度为杀虫0.039mg/L，对氯邻甲苯胺0.042mg/L。本标准适用于接触杀虫工人尿中杀虫和对氯邻甲苯胺含量的测定。2原理尿中杀虫胀及对氯邻甲苯胺在碱性条件下用石油醚萃取，然后用盐酸溶液从有机相中反萃取，将酸萃取液中和后，经重氮化、偶合生成紫红色染料，在552nm波长下比色定量，分别计算杀虫滕和对氯邻甲苯胺含量。3仪器3.1分光光度计，10mm比色杯。3.2具塞试管，10mL。3.3分液漏斗，250mL，150mL。3.4恒温水浴箱。3.5聚乙烯塑料瓶，500mL。3.6尿比重计。4 试剂本标准所用试剂除另有说明外，均为分析纯。4.1实验用水，蒸馏水或具同等纯度的去离子水，4. 2盐酸,P2o == 1. 19 g /mL。4.3杀虫。4.4对氯邻甲苯胺。4.5石油醚，沸程60～90℃。4.6#盐酸溶液，1mol/L。4.7氢氧化钠溶液，2.5mol/L。4.8饱和氯化钠溶液。4.9酚溶液，10g/L。4.10盐酸乙醇溶液，取90mL盐酸（4.2），加水稀释至300mL，加95%乙醇至1000ml.。中华人民共和国卫生部1996-10-14批准1997-05-01实施 WS/T65-19964.11亚硝酸钠溶液，40g/L。4.12氨基磺酸铵溶液，30g/L。4.13盐酸萘乙二胺盐酸盐溶液，10g/L。4.14杀虫（或对氯邻甲苯胺）标准溶液：称取0.1000g杀虫（4.3）或对氯邻甲苯胺（4.4）加10mL盐酸溶液（4.5)溶解，定量移入100mL容量瓶内，用水稀释至刻度。此溶液1mL相当于1.0mg杀虫胀或对氯邻甲苯胺。临用前，用水稀释成1mL相当于10 μg杀虫滕或对氮邻甲苯胺的标准应用溶液。4.15质控样：用加标的模拟尿、接触者混合尿或加标的正常人混合尿作质控样。5采样、运输和保存用聚氯乙烯瓶收集接触杀虫后的次日晨尿至少200mL，尽快测定比重后，每100mL尿样加入1mL盐酸（4.2），于4℃冰箱内存放，至少可保存两周。分析前要将尿样彻底摇匀。6分析步骤6.1样品处理取100mL尿样于分液漏斗中，加5mL氢氧化钠溶液（4.7），摇匀，加30mL石油醚（4.5），轻轻摇2min，静置分层后，弃去尿液，加15mL饱和氮化钠溶液洗涤石油醚层，洗至醚层无尿色为止，将醚层移入150mL分液漏斗中，用盐酸溶液（4.6）萃取醚层3次，每次2mL，振摇1min，静置分层后，收集盐酸溶液层于同一支具塞试管中，加1滴酚酸溶液，用氢氧化钠溶液（4.7）调至红色，再用盐酸溶液（4.6）调至无色，加水至10mL，混匀，为样品萃取液。6.2标准曲线的绘制6.2.1杀虫标准曲线的制备：取6支具塞试管，按表1配制标准管。表1杀虫滕标准管的配制管号012345标准应用液（4.14），ml.00.100.501. 001.502. 00水,mL2.502.402. 001.501. 000.50杀虫的含量，ug01. 05. 010.015. 020. 06.2.1.1每管中各加入0.5mL氢氧化钠溶液（4.7），摇匀，盖上塞子，在高于90C水浴中加热30min，取出冷却，加入2.5mL盐酸乙醇溶液（4.10），混匀，放冷。6.2.1.2各管中分别加入0.1mL亚硝酸钠溶液，摇匀，放置5min，加入1ml.氨基磺酸铵溶液，剧烈振摇1min，放置20min，加入1mL盐酸萘乙二胺盐酸盐溶液，摇匀，于室温放置30min，于552nm波长下，以试剂空白为参比（0号管），测量各管吸光度，以杀虫含量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。6.2.2对氯邻甲苯胺标准曲线的制备：取6支具塞试管，按表2配制标准管。表2对氯邻甲苯胺标准管的配制管号012345标准应用液（4.14)，mL00.100.501. 001.502. 00水,mL2. 402.502. 001.501. 000.50对氯邻甲苯胺的含量，ug01. 05. 010. 020. 015.06.2.2.1各管中分别加入0.5mL氢氧化钠溶液（4.7)，立即再加入2.5mL盐酸乙醇溶液，混匀。 WS/T 65-19966.2.2.2以下按6.2.1.2条操作，测量各管吸光度，以对氯邻甲苯胺含量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。6.3样品测定6.3.1取二支具塞试管，分别标明S，和S2，然后各加入经6.1条处理的样品萃取液2.5mL。6.3.2以下