SN_T 0673-2011进出口肉及肉制品中盐霉素残留量检测方法 酶联免疫法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 0673-2011代替 SN/T 0673—1997进出口肉及肉制品中盐霉素残留量检测方法酶联免疫法内Determination of Salinomycin residues in meat andmeat products for import and export-Enzyme linked immunosorbent assay2011-07-01 实施2011-02-25 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准进出口肉及肉制品中盐霉素残留量检测方法酶联免疫法SN/T 0673—2011*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 www.spc. net. cn电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷￥开本880×12301/16　印张0.5　字数９千字2011年6月第一版反　2011年6月第一次印刷印数 1 -1 600*书号：155066·2-22158 SN/T 0673--2011言前 本标准按照 GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准代替SN/T0673一1997《出口肉及肉制品中盐霉素残留量检验方法滤纸片法》。本标准与 SN/T0673一1997相比，主要技术变化如下：将原标准的检测方法滤纸片法变更为酶联免疫法；将原标准中文名称《出口肉及肉制品中盐霉素残留量检验方法滤纸片法》修订为《进出口肉及肉制品中盐霉素残留量检验方法酶联免疫法》；修改了适用的范围；删除了原标准的抽样内容。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局，中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局。本标准主要起草人：赵良娟、贺艳、孙哲平、张宏伟、郑文杰、赵宏、高旗利、候丽萍、闫煜。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-SN 0673--1997。 SN/T 0673—2011进出口肉及肉制品中盐霉素残留量检测方法酶联免疫法１　范围本标准规定了进出口肉及肉制品中盐霉素残留量的酶联免疫测定方法。本标准适用于进出口鸡肉中盐霉素残留量的检测→其他肉及肉制品可参照执行。2试剂和材料更高级别。水为去离子水。除另有规定外，所用化学试剂均为分析纯，享2.1盐霉素酶联免疫定量测定试剂盒（参见附录 A)。2.2甲醇。2.3氯化钠。2.4 二氯甲烷。2.5氢氧化钠。2.68%的氯化钠溶液：称取 8.0-g氯化钠加去离子水溶解定容至.1d0 mL。甲醇-8%氯化钠溶液:80mL甲醇加人到20ml8%的氯化钠溶液中混匀。 mol/L氢氧化钠-8%氯化钠溶液：称最 2.0 g氢氧化钠加8%氯化钠溶液溶解定容至100 mL2.9·复溶工作液：用去离子水将2×浓缩复溶液按1：1,体积比进行稀释。4℃环境可保存1个月。2.10洗涤工作液：用去离子水将20×浓缩洗涤液按1：19体积比进行稀释。4℃环境可保存1个月。2.11盐霉素标准品：标准品纯度≥98%。2.12盐霉素标准品溶液的配制：准确称取适量的盐霉素标准品，用复溶工作液配制成1mg/mL标准贮备溶液，于4℃～8℃条件下保存。3仪器和设备3.1酶标仪：波长450nm。3.2匀浆机。3.3振荡器。天平:量程2 kg,感量 0.1 g。3.43.5离心机：5000g。3.6氮气吹于仪。洗板机。3.7微量加样器:20 μL、50 μL、100 μL、200 μL。3.8微量多通道加样器：50μL、100μL。3. 9给出该信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对某一产品操作步骤的认可。如果其他产品的操作步骤有1）不同，需经实验评估后采用。1 SN/T 0673--20114试样的制备和保存4.1试样的制备从所取全部样品中取出有代表性样品约1kg，充分搅碎，混匀，采用四分法，将样品分成两等份，装人洁净容器，加封并做标识。4.2试样的保存试样放置一20℃～一18℃条件下保存。5测定方法5.1　方法提要本方法的测定基础是间接竞争性酶联免疫反应，样本中的盐霉素与微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗盐霉素抗体，加人酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光值与其所含盐霉素的含量成负相关，按绘制的校正曲线定量计算即可得出盐霉素的含量。5.2样品处理称取2.0g试样均质物至离心管中，加人8mL甲醇-8%氯化钠溶液，剧烈振荡5min，4500g以上离心10min;移取2mL上清液加人4mL0.5moL/L氢氧化钠-8%氯化钠溶液，混合均匀，再加10mL二氯甲烷，振荡5min，4500g离心10min;除去上层取下层5mL至试管中，于50℃～60℃水浴氮气吹干；用1 mL复溶工作液溶解干燥的残留物;取50 μL用于分析。5.3酶联免疫法测定5.3.1操作