NY_T 3152.5-2017微生物农药 环境风险评价试验准则 第5部分：溞类毒性试验.pdf

ICS 65.020B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3152.5—2017环境风险评价试验准则微生物农药第5部分：泽类毒性试验Risk assessment test guidelines for microbial pesticide-Part 5:Daphnia toxicity test2018-06-01实施2017-12-22发布中华人民共和国农业部发布 NY/T3152.5—2017前言NY/T3152《微生物农药环境风险评价试验准则》分为6个部分：第1部分：鸟类毒性试验；-第2部分：蜜蜂毒性试验；一第3部分：家蚕毒性试验；一第4部分：鱼类毒性试验；——第5部分：涵类毒性试验；——第6部分：藻类生长影响试验。本部分为NY/T3152的第5部分。本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由农业部种植业司提出并归口。本部分起草单位：农业部农药检定所、环境保护部南京环境科学研究所。本部分主要起草人：谭丽超、周艳明、卜元卿、续卫利、姜辉、陈朗、田丰。I NY/T3152.5—2017微生物农药环境风险评价试验准则第5部分：泽类毒性试验1范围本部分规定了微生物农药对遥类毒性试验的材料、条件、试验操作、质量控制、试验报告等的基本要求。本部分适用于微生物农药登记而进行的潼类毒性试验。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T31270.13化学农药环境安全评价试验准则第13部分：遥类急性活动抑制试验3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1microbial pesticides微生物农药是以细菌、真菌、病毒和原生动物或基因修饰的微生物等活体为有效成分，具有防治病、虫、草、鼠等有害生物作用的农药。3. 2供试物test substance试验中需要测试的物质。3. 3菌落形成单位colonyformingunit，CFU由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落。3. 4细菌芽孢、真菌孢子、细菌或原生动物孢囊bacterial or fungal spore and bacterial or protozoan cyst显微镜下一个完整的个体芽孢、孢子或孢囊，通常是指能在合适的培养基上形成单个CFU的一个完整的实体。3.5细菌营养体vegetative bacterium单个活的生物体，通常是指能在合适的培养基上形成一个CFU的实体。3. 6原生生物protozoa原生生物门各个成员的一个完整的营养体、孢子或孢囊，3.7病毒virus显微镜下一个完整的病毒颗粒或包涵体。1 NY/T3152.5—20173. 8最大危害暴露量maximumhazardexposurelevel微生物农药有效成分在环境中对非靶生物可能产生危害的最大暴露量，通常以预测暴露量与安全系数的乘积来表示。3. 9毒性toxicity微生物和/或毒素引起受试生物中毒或病变的能力。其作用过程不一定同时发生微生物的感染、复制和生命活动。3. 10半数抑制量medianeffectivedoseorconcentration，EDso/ECso在规定时间内，通过指定感染途径，引起50%受试生物活动受抑制时所需最小微生物数量或毒素量。3. 11活动抑制immobilisation轻晃试验容器，遥在15s内不能游动视为活动抑制，但允许附肢微弱活动。4试验概述在一定试验条件下，以一定的供试物浓度或剂量测试对受试的活动受抑制情况。当供试物最大危害暴露量出现对受试生物50%及以上具有活动抑制时，则还需进行剂量效应试验和活动抑制验证试验。活动抑制以ED50/EC5o表征。5试验方法5.1材料和条件5.1.1供试生物推荐使用大型遥（DaphniamagnaStraus），保持良好的培养条件，使大型遥的繁殖处于孤雌生殖状态。选用实验室条件下培养3代以上、出生24h内的非头胎遥。受试遥应来源于同一母系的健康涵未表现任何受胁迫现象（如死亡率高、出现雄遥和冬卵、头胎延迟、体色异常等）。5.1.2供试物类型微生物母药、制剂产品等。批次通常情况下，试验中供试物应采用同一批次的产品。但在不得不使用另一批次产品时，应在试验报告中记录供试物的批次。计数方法计数方法如下：-细菌可采用稀释平板菌落计数法、荧光定量PCR等测定；一真菌孢子以CFU为计数单位，可采用稀释平板菌落计数法或血球计数板法等测定；一原生动物以个体数目为计数单位，可采用血球计数板法等测定；一病毒以包涵体等感染单位为计数单位，可采用荧光定量PCR、血球计数板法等测定