WST 248-2005厌氧菌的抗微生物药敏感试验方法.pdf

ICS 11.020C50备案号：15864--2005WS中华人民共和国卫生行业标准WS/T 248—2005厌氧菌的抗微生物药敏感试验方法 Methods for Antimicrobial Susceptibility Testingof Anaerobic Bacteria2005-12-01实施2005-05-08 发布中华人民共和国中生都发布 WS/T 248--2005前言本标准是在卫生部颁发的《全国临床检验操作规程》第三版)的基础上，依据美国国家临床实验室标准化委员会(National Committee for Clinical Laboratory Standards,NCCLS) M11-A5 文件-厌氧菌的抗微生物药敏感试验方法（已批准的标准一第五版)[ISBN1-56238-429-5],结合中国实际情况和要求制定。本标准的附录 A 为资料性附录。本标准从2005年12月1日起实施。本标准由卫生部提出。本标准起草单位：北京大学人民医院检验科。本标准主要起草人：张正、岳志红。本标准由卫生部负责解释。 WS/T 248-2005厌氧菌的抗微生物药敏感试验方法1 范围本文件所述方法主要用于测试普通分离到的厌氧菌。琼脂稀释法可用于测试大多数厌氧病原菌。目前微量肉汤稀释法仅用于测试脆弱拟杆菌菌群的病原菌。本标准适用于厌氧菌的抗微生物药敏感试验。2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2.1琼脂稀释敏感试验将某一种抗微生物药的系列浓度混入用于敏感试验的琼脂生长培养基进行的抗微生物药敏感试验。2.2敏感指该菌株所致感染可以用推荐用于此型感染及病原菌的抗微生物药剂量进行合理地治疗。2.3中介药物在生理浓集的部位具有临床效力或者可用高于正常剂量的药物进行治疗；另外还包括一个“缓冲区可以防止微小的、未能控制的技术因素造成的重大结果解释错误。2.4耐药指常规剂量的抗微生物药不能抑制该菌株的生长和/或该菌株的MIC低于某范围内。在此范围内，可存在某些特定的耐药机制(如β-内酰胺酶类),并且临床治疗显示其疗效并不可靠。2.5最低抑菌浓度琼脂或肉汤稀释敏感试验中抗微生物药抑制某一种微生物可见生长的最低浓度。3厌氧菌敏感试验的指征临床上有厌氧菌感染存在并在实验室分离出厌氧菌，原则上均应进行抗微生物药敏感试验。3.1常规试验从脑脓肿、心内膜炎、骨髓炎、关节感染、人工装置或人工血管感染及菌血症分离到的特殊感染的标本应该测试,并应参考临床医生的合理建议。当感染的性质不清楚，标本含有内源性厌氧菌菌群，而且病原菌与正在治疗的感染关系很小时，通常不必做敏感试验。当存在多种厌氧菌时，参考临床情况选择可能引起厌氧菌感染的最重要菌种进行敏感试验。一般分离到拟杆菌属、普雷沃菌属、梭杆菌属、梭菌属、嗜胆菌属和萨顿菌属的一些菌种应做敏感试验。敏感试验应使用分纯后菌悬液。一般不能直接用临床标本进行敏感试验。MIC试验一般采用倍比稀释。采用本标准推荐方法，做好质控，结果报告采用在实际终点时的一个倍比稀释范围内较为科学。例如：终点为16μg/ml,真正报告应（8～32)μg/ml范围更好。并做出敏感、中介或耐药判断，以供临床参考。3.2监测试验当技术条件不允许每个实验室都进行厌氧菌敏感试验时，建议建立当地参考实验室，收集一定量临床菌株（不少于50～100株），集中测试后公布结果供大家参考。4厌氧菌敏感试验的局限性体外结果不足以预测某个病人对厌氧菌感染治疗的反应，仅供临床选药参考。此标准的试验方法1 WS/T 248--2005也并不定适用于所有的厌氧菌，需考虑以下两点。4.1折点和临床相关关于确定厌氧菌对大多数抗微生物药的敏感性的折点，现在并无一致意见。目前折点的确定是基于动物模型或需氧和厌氧菌多重感染的病人的临床试验结果。因为大多数厌氧菌感染发生于密闭空间，涉及多种微生物，单一抗微生物药抗单一微生物的体外活性并不直接与其体内效力相关。除数目分布和临床效力之外，MIC结果的敏感和中介折点解释是基于最大的推荐剂量获得的血清水平，因为厌氧菌感染通常推荐最大剂量用药。建立中介范围是因为有些药物难于判读终点和MIC在折点附近聚集。4.2病原菌琼脂稀释法适用于测试多种不同的厌氧菌。至今为止，微量肉汤稀释法仅限于测试脆弱拟杆菌菌群。当测试菌呈蔓延生长时（例如艰难梭菌或破伤风梭菌）则需要尽量在琼脂平板上划开接种物。而对于败毒梭菌，每个平板只能测试一个分离株5抗微生物药5.1来源抗微生物药标准品或参考药品可直接来自广商，或来自中国药品及食品监督管理局检定所及其他商业途径。不应把罪肠道的制品用于敏感试验。可接受的药晶应贴有标签，标明药品的通用名，批号，分析活力（常用每ng药品中含μg或国际单位（IU)表示）和有效期。贮存于规定的温度和湿度中。用时防止冷凝水进春5.2抗微生物药的