SBT 10386-2004畜禽肉中氯霉素的测定.pdf

ICS 67. 120X 04SB备案号：14167—2004中华人民共和国国内贸易行业标准SB/T 10386—2004畜禽肉中氯霉素的测定Determination of chloramphenicol in meat of livestock and poultry2004-08-04发布2004-09-01实施电药高心中华人民共和国商务部发布数码防伪 SB/T 10386—2004前言本标准由中华人民共和国商务部提出。本标准由商务部屠宰技术鉴定中心负责起草，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、河北省疾病预防控制中心参加起草。本标准主要起草人：刘文娟、杨祖英、宋书锋、韩会新、张新玲、刘虎成、王贵际。本标准委托商务部屠宰技术鉴定中心负责解释1 SB/T103862004畜禽肉中氯霉素的测定1范围本标准规定了备、禽肉中氯霉素的测定方法。本标准适用于畜、禽肉中氯霉素的检验。2原理试样中残留的氯霉素经乙酸乙酯提取后，经减压浓缩，用0.5mol/1.高氯酸溶解残渣，用正已烷去除脂肪，经微孔滤膜过滤后，滤液供高效液相色谱分析。3试剂和材料以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂，水为重蒸水。3.1甲醇：色谱纯。3.2正已烷。3.3氯霉紫每毫克相当994单位，含量≥99%。3.4乙酸乙酯。3.5高氯酸。3.6氯霉素标准储备液：精确称取0.010g氯霉素标准品，置于100ml.容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。此溶液浓度为0.10mg/mI，置于冰箱中保存，有效期3个月。3.7氯霉素标准.1.作液：精确吸取5.0mL储备液于50mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。此溶液浓度10μg/ml.，置于冰箱保存。有效期半个月。临用前取此液用0.5mol/L高氯酸稀释成适当浓度的标准工作液。4仪器和设备4.17高效液相色谱仪（配紫外检测器）。4.2旋转蒸发仪。4.3涡流混勾器。4.4超声波发生器。4.5旋转蒸发仪。4.6微孔滤膜过滤。5测定步骤5.1提取取200g试样绞碎，称取20g（精确至0.01g）绞碎后的试样，置于100ml.具塞三角瓶中，加入40ml.乙酸乙酯，振摇，超声提取30min，过滤，滤液放于另一三角瓶中。再加人20ml.乙酸乙酯于试样中，超声提取15min，过滤，滤液合并，滤渣再加20mL乙酸乙酯超声提取15min，过滤，滤液合并，全部滤液合并转入浓缩瓶中。5.2净化将合并的滤液于52℃~55℃水浴旋转蒸发仪上浓缩至干。准确加入1.0mL.0.5mol/L高氯酸溶液洗涤浓缩瓶中残留物，再加入1mL正已烷，振摇1min，将全部溶液转移至5mL试管中，静止分层，1 SB/T10386—2004吸弃正已烷层，再加入2mL正已烷提取脂肪，再吸弃正已烷层，高氯酸溶液过0.45um滤膜，滤液供高效液相色谱测定。5.3测定5.3.1液相色谱参考条件a)色谱柱：Hypersil 0DS2250mmX4.6mm，粒径5μm;b)流动相：甲醇+水=45+55；c)流速：1.0mL/min;d)检测波长：280nm；c)柱温：室温；f）进样量：20μl.。氯霉素标准曲线的制备5.3.2依照上述色谱条件，分别注人标准工作液各点。每个标准液进20uI测定其峰面积，然后以标准液浓度对峰面积作校准曲线，求出回归方程及相关系数。5.3.3样品的测定在上述色谱条件下，吸取已净化的样品溶液20μL，进行HPIC分析。6结果6.1计算将标准曲线各点的浓度与对应的峰面积进行回归分析，然后按式（1)分别计算供试样中氯霉素的含量。X=cXV×1 000(1)m×1000式中：X样品中氯霉素的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；被测液中氯霉素的含量，单位为微克每毫升（μg/mL）；CV—被测液体积，单位为毫升（mL）；m样品质量，单位为克（g）。6.2检出限本方法的检测限为0.01uμg/mL，当取样量为20g时，最低检测量为1.0ug/kg，7允许差同一分析者同时或相继两次测定结果之差不得超过均值的15%。