SC_T 7219.2-2015三代虫病诊断规程 第2部分：鲩三代虫病.pdf

ICS 65.020.30B 50SC中华人民共和国水产行业标准SC/T 7219.2--2015三代虫病诊断规程第2部分：鲩皖三代虫病Protocols for diagnosis of Gyrodactylosis-Part 2 : Infection with Gyrodactylus ctenopharyngodontis2015-0209发布2015-05-01实施中华人民共和国农业部发布 SC/T 7219. 2--2015前創言SC/T 7219《三代虫病诊断规程》为系列标准：第1部分：大西洋鲑三代虫病；第2部分：鲩三代虫病；第 3部分:鲢三代虫病;--第4部分：中型三代虫病;一第5部分：细锚三代虫病；一第6部分：小林三代虫病;本部分为SC/T7219的第2部分。本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由农业部渔业渔政管理局提出。本部分由全国水产标准化技术委员会（SAC/TC156)归口。本部分起草单位：中国科学院水生生物研究所、全国水产技术推广总站。本部分主要起草人：李文祥、王桂堂、邹红、吴山功、陈爱平。1 SC/T 7219. 2—2015三代虫病诊断规程第2部分:鲩三代虫病1范围本部分规定了鲩三代虫病的感染对象与临床症状，鲩三代虫（Gyrodactylus ctenopharyngodontis）的采集与固定、形态学鉴定的方法以及鲩三代虫病的判定。本部分适用于草鱼的鲩三代虫病的流行病学调查、诊断、监测和检疫2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。SC/T 7103水生动物产地检疫采样技术规范3试剂和材料3.1乙醇：分析纯。3.2 甘油。3.3饱和苦味酸铵：分析纯。4　仪器和设备4.1解剖盘、剪刀、镊子、解剖针和手术刀4.2体视显微镜和带测微标尺的光学显微镜。4.3盖玻片、载玻片和培养皿。4.4电子天平。4.5样品管。5 感染对象与临床症状5.1感染对象鲩三代虫能感染草鱼(Ctenopharyngodon idellus)和青鱼(piceus)等。5. 2 临床症状鲩三代虫主要寄生于体表，病鱼常出现蹭擦池壁、跃出水面的行为；有些病鱼反应迟钝，常在水流缓慢的地方出现，体表因黏液增多变成淡灰色，背鳍、尾鳍和胸鳍的边缘出现糜烂。6三代虫采集与固定6. 1 病鱼采集仔细观察待检鱼类的临床症状和行为，捞取具有典型症状的鱼类。采样方法、样品数量、样品封存和运输应符合SC/T7103的规定。6.2三代虫样品的采集6.2.1现场采集1 SC/T 7219. 2—2015剪取鳍条、鳃丝或刮取部分体表黏液，置于载玻片上；滴加数滴清水，置于体视显微镜下观察。用解剖针将三代虫从鳍条或鳃丝或体表黏液中分离，用吸管吸出，放在盛有清水的培养Ⅲ中，每尾病鱼至少采集成虫10条。6.2.2固定病鱼中的采集剪取病鱼鳍条或鳃丝放在载玻片上，逐滴加入自来水浸泡10min，置于体视显微镜下观察。发现三代虫后，用解剖针将虫体分离，放在盛有清水的培养皿中；同时，镜检固定病鱼所用容器底部的沉淀物。如发现有从鱼体脱落的三代虫，用吸管吸出，放在盛有清水的培养血中。6.3三代虫样品的固定与保存加一滴清水到载玻片上，用吸管吸取一个虫体置于水滴中，轻轻地盖上盖玻片。用一张滤纸在盖玻片边缘缓慢吸水，直到水基本吸干为止。加上一滴APG溶液（饱和苦味酸铵溶液与甘油等比例混合液）到盖玻片边缘，直到浸满盖玻片与载玻片之间的空隙。用于形态学鉴定的虫体样本可用70%酒精保存，用于PCR鉴定的虫体样品可用95%酒精保存。7 皖三代虫的形态学鉴定鲩三代虫运动如尺；虫体呈长叶形，体长0.3mm～0.6mm，体前有2个头器，无黑色眼点；虫体后端具几丁质的伞状后吸器，其上有1对锚钩、16个边缘小钩和1根腹联结片，可依此进行鉴定。鲩三代虫后吸器的锚钩、边缘小钩和腹联结片的形态特征、测量部位及其大小见附录A。如果虫体后吸器的形态特征和测量大小与附录A相符，则可判定为鲩三代虫。8 鲩三代虫病的判定草鱼感染鲩三代虫，且病鱼临床症状符合5.2描述，则判定为鲩三代虫病。2 SC/T 7219. 2—2015附录A(规范性附录）皖三代虫后吸器的形态测量A.1鲩三代虫后吸器锚钩的测量部位及大小见图A.1。10 μm说明：全长(49. 0 μm~66. 0 μm);-钩尖长(20.0 μm~28. 0 μm);钩柄长(30. 0 μm～38. 0 μm);-基部长(15. 0 μm～24. 0 μm)。图A.1锚钩的测量部位及大小A.2皖三代虫后吸器边缘小钩的测量部位及大小见图A.2。1