细菌及细菌类疾病的实验室诊断—细菌的新陈代谢和人工培养（动物微生物技术课件）.pptx

动物微生物应用技术;细菌的人工培养;人工培养的基本条件：;按主要营养物质的来源：天然培养基和合成培养基 按物理状态：固体、液体、半固体培养基 按用途：基础培养基 营养培养基 选择培养基 鉴别培养基 厌氧培养基;液体培养基：含有各种营养成分的水溶液。如肉汤培养基。 固体培养基：在液体培养基中加入凝固剂（如1.5%-2%琼脂）。如琼脂斜面培养基、琼脂平板培养基。 半固体培养基：在液体培养基中加入0.5%的琼脂制成。 ;基础培养基：满足一般微生物生长繁殖所需要的营养物质。如肉汤培养基。 营养培养基：只适合某种微生物生长而不适合其他微生物生长配制的培养基，这种方法达到分离这种微生物的目的。如血液琼脂平板就是在琼脂平板中加入血液、血清或动植物提取液，链球菌、肺炎球菌在其上生长良好。;增菌培养基：在基础培养基或营养培养基中加入某种细菌生长所需的特殊营养成分，只适合这种微生物生长而不适合其他微生物生长的培养基。如亚硝酸盐增菌培养基适合沙门氏菌的生长。;鉴别培养基：在基础培养基中加入某种细菌生长所需特殊化学物质，某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物，而这种代谢产物可以与培养基中的化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征性变化，可将该微生物与其他微生物加以区别开来。如糖发酵管、硫化氢培养基等。;选择培养基：根据不同微生物对营养的特殊要求，或对物理化学条件的抗性而设计的培养基，利用这一类培养基可以把需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。如SS琼脂，分离肠道菌等。;厌氧培养基：在无氧环境下生长繁殖。如在肝片肉汤培养基上覆盖液状石蜡等。;二、细菌在培养基中的生长现象;在液体培养基中的生长情况;液体培养基中;分离培养：将标本或培养物划线接种在固体培养基的表面，因划线的分散作用，使许多原混杂的细菌在固体培养基表面上散开。 菌落：单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见的细菌群落。 菌苔：多个菌落连成一片。;细菌在固体培养基中的生长情况;有鞭毛细菌：扩散生长，周围浑浊 无鞭毛细菌：沿穿刺线生长，周围透明;在半固体培养基中的生长情况：常用于观察细菌动力 ;混浊生长;三、人工培养细菌的意义;动物微生物应用技术;细菌的新陈代谢;细菌的新陈代谢;一、分解代谢产物;（1）糖（醇、苷）类发酵试验;（1）糖（醇、苷）类发酵试验;（2）V-P试验;阳性红色 产气杆菌;（3）甲基红试验;（4）枸橼酸盐利用试验;（1）吲哚试验;（2）硫化氢试验;（3）尿素（脲）酶试验;（二）合成代谢产物;3. 与鉴别细菌有关的代谢产物 （1）色素 （2）细菌素 ;（1）热原质（致热原） 细菌合成的一种极微量注入人或动物体内即能引起发热反应的物质。大多数是G-菌的脂多糖。 耐高温，高压蒸汽灭菌（121.3℃，20min）不能破坏，180℃ 4h 或 250℃ 45min 或650℃ 1min 才能被破坏。;（2）毒素 内毒素：G－菌崩解死亡后释放出来的脂多糖。无特异性、毒性弱、抗原性弱。甲醛处理后不能使其完全脱毒，因此不能制成类毒素。 ;（2）毒素 外毒素：具有抗原性强、毒性强、特异性强等特点。 类毒素：外毒素经0.3%-0.5%甲醛37℃处理后，其毒性完全丧失，但仍保留良好的抗原特性，是预防传染病的一类重要的生物制品。 抗毒素：外毒素可刺激机体产生特异性免疫抗体，这种抗体称为抗毒素。;（3）侵袭性酶 具有侵袭性的胞外酶，能损伤机体组织、促进细菌的侵袭、扩散，是细菌的重要致病物质。如链球菌的透明质酸酶。;（1）抗生素：多粘菌素、杆菌肽。 （2）维生素：某些肠道菌合成，如B族维生素、VK。;（1）色素：金黄色葡萄球菌——金黄色色素（脂溶性）、铜绿假单胞菌——-绿色色素（水溶性），可用于细菌鉴别。 （2）细菌素：只能杀伤有亲缘关系的细菌，如大肠菌素。无治疗意义，有助于细菌分型。;（1）应用：疫苗效价检查、血清效价测定、药物治疗效果检测。 （2）方法：用递减剂量的病原菌感染易感动物。 （3）表示方法： 最小致死量（MLD）： 半数致死量（LD50）： 最小感染量（MID）： 半数感染量（ID50）： 细菌毒力的大小可以随自然和人工条件的改变而变化。掌握病原菌的毒力具有重要的临床意义。