NYT 1738-2009农作物及其产品中磷含量的测定 分光光度法.pdf

ICS 67.050X 04NY中华人民共和国农业行业标准NY/T作物及其产品中磷含量的测定分光光度法Determination of phosphorus content in crops and derived products一spectrophotometry2009-05-20实施2009-04-23 发布中华人民共和国农业部发布 NY/T 1738—2009前言本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口本标准起草单位：中国水稻研究所、农业部稻米及制品质量监督检验测试中心。本标准的主要起草人：段彬伍、徐霞、朱智伟、谢黎虹、郭望模、陈能 NY/T 1738—2009分光光度法农作物及其产品中磷含量的测定1 范围本标准规定了农作物及其产品中磷含量的分光光度测定法。本标准适用于农作物及其产品中磷的测定。本标准方法的线性范围为 1.0 mg/L～20 mg/L。本标准方法的检出限为 6 μg。2原理试样经酸消解后，在酸性条件下正磷酸根与偏钒酸铵和钼酸铵作用，生成黄色的络合物［（NH4）：PO4·NH4VO：·16MoO:（钼黄），在波长400 nm处测定吸光度值，其吸光度值与磷含量成正比。3试剂除非另有说明,在实验中仅使用为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。3.1 硫酸(H2SO4)。3.2 硝酸(HNO:)。3.3高氯酸(HCIO4）。3.4氢氧化钠(NaOH)。3.5偏钒酸铵（NH4VOs）。3.6 钼酸铵(NH4).Mo,O24·4H²O。3.7磷酸二氢钾(KH2PO4）：优级纯。3.8高氯酸一硝酸混合液L(HCIO4+HNO:）一1十4]：分别吸取80mL硝酸、20mL高氯酸,混匀。3.9氢氧化钠溶液[c(NaOH)=6 mol/L]:称取 24g氢氧化钠(3.4)溶于100 mL蒸馏水中,混匀。3.10钒钼酸铵显色剂：称取1.25g偏钒酸铵（3.5)溶于300mL沸水中，冷却后加人250mL硝酸（3.2)。再称取25.0g钼酸铵(3.6)溶于 400mL水中。将钼酸铵溶液缓慢地注入偏钒酸铵溶液中，随时搅拌,用水稀释至 1 000 mL,混匀,贮藏在棕色瓶中备用。注：在保存过程中有沉淀生成时,不能再使用。3.11磷标准使用液（100mg/L）：准确称取 0.439 4g在 105℃下恒重的磷酸二氢钾（3.7),水溶解后加5mL硫酸(3.1),稀释定容至 1000mL 容量瓶中,混匀。3. 12二硝基酚指示剂:称取0.25 g 2,4~二硝基酚或 2,6-二硝基酚溶于100 mL水中。4仪器4.1分光光度计。4.2可调式电热板。4.3分析天平：精度士0.1mg。4.4锥形烧瓶或凯氏烧瓶。I NY/T 1738—20095试样制备5.1干试样：除去可见杂质，混匀缩分至约50g，粉碎，过0.42mm筛，混勾，备用。5.2新鲜试样：将鲜样(如为果蔬类样品则仅取可食部分)用干净纱布轻轻擦去样本表面的附着物或清洗干净并用滤纸吸干水分，采用对角线分割法，取对角部分，将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放入食品加工机中捣成匀浆，备用。6 分析步骤6.1试样消解称取干样0.5g～2g(精确至0.0001g)或鲜样5g～20g(精确至0.001g)置于150mL锥形烧瓶或凯氏烧瓶中，干样需先加几滴水湿润样品，然后加人5mL硫酸（3.1)和5mL高氯酸一硝酸混合液（3.8），加盖小漏斗放置10min，置于电热板上低温缓缓加热，待分解作用缓和再升温继续消解。若消解液剩余约5mL时仍有未分解之物或色泽较深,取下稍冷,补加硝酸 3mL～5mL,再消解至5mL左右，如此重复操作直至待消解液呈无色或微带黄色清亮液体。冷却至室温并将消解液用水转移至100mL容量瓶中，定容，作为试料待测液备用。6.2　测定6.2.1标准曲线的绘制准确吸取磷标准使用液 0mL、0.5mL、1.0mL、2. 0mL、3.0mL、4.0mL、5.0 mL(相当于0. 00 μg、50.0 μg、100 μg、200μg、300μg、400 μg、500 μg磷），分别置于50 mL容量瓶中,加人10.0mL钒钼酸铵显色剂（3.10），加水定容。静置15min后，在分光光度计波长400nm处，用1cm比色血测定标准溶液的吸光度。以磷的质量(以 ug表示)为横坐标,相应的吸光度值为纵坐标,求得标准曲线方程。6.2.2样品测定准确吸取试料待测液（6.1)5.00mL～20.00 mL置于50 mL容量瓶中，加 2滴二硝基酚指示剂（3.12），用氢氧化钠溶液（3.9)中和至刚呈微黄色，加人10.0mL钒钼酸铵显色剂（3.10），加水定容。静置15min后，在分光光度计波长400nm处，用1cm比色Ⅲ测定溶液的吸光度。将测得吸光度值代人标准曲