SN_T 2748-2010进出口动物源性食品中多肽类兽药残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2748—2010进出口动物源性食品中多肽类兽药残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of peptide vererinary drug residues in foodstuffs of animalorigin for import and export---LC-MS/MS method2011-05-01实施2010-11-01 发布中华人民共和国B发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2748—2010前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局。本标准主要起草人：孙兴权、田苗、林维宣、肖珊珊、董伟峰、于灵。 SN/T 2748--2010进出口动物源性食品中多肽类兽药残留量的测定‧液相色谱-质谱/质谱法1 范围本标准规定了进出口动物源性食品中杆菌肽 A、粘杆菌素 A、粘杆菌素B和维吉尼霉素 M1残留量测定液相色谱-质谱/质谱检测方法。本标准适用于猪肉、猪肝、猪肾和牛乳中杆菌肽 A、粘杆菌素 A、粘杆菌素 B和维吉尼霉素 M1 残留量的检测和确证。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要样品用0.1%甲酸-甲醇混合溶液提取，提取液经正已烷萃取脱脂，固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱测定和确证，外标法定量。4　试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。4.1乙腈：高效液相色谱级。4.2甲醇：高效液相色谱级。4.3甲酸：高效液相色谱级。4.4正已烷：高效液相色谱级。4.5盐酸。4.66 mol/L盐酸溶液:量取 540 mL盐酸(4.5),注人 1 000 mL水中,混匀。:4.70.1%甲酸水溶液：取1mL甲酸,用水稀释至1000mL。4.80.1%甲酸-甲醇溶液(5十2,体积比）:0.1%甲酸水溶液（4.7)500mL与200mL甲醇（4.2)混溶即可。4.90.1%甲酸-甲醇溶液(4+1,体积比）:0.1%甲酸水溶液（4.7)400mL与100mL甲醇（4.2)混溶即可。4.100.1%甲酸-甲醇溶液饱和正已烷：500mL0.1%甲酸-甲醇溶液（4.8）中加人100mL正已烷（4.4），充分振荡混合，静置备用。4.11多肽类标准品：杆菌肽 A、粘杆菌素和维吉尼霉素 M1标准品纯度均大于等于 95%,标准品信息见附录 A表 A.1。4.12多肽类标准储备溶液：称取适量标准品（4.11），分别用0.1%甲酸-甲醇溶液（4.9)溶解（超声助溶），配制成浓度为500μg/mL的标准储备溶液，于4℃避光保存。1 SN/T 2748—20104.13混合标准储备液：分别吸取适量的杆菌肽A、粘杆菌素和维吉尼霉素M1标准储备液，用0.1%甲酸-甲醇溶液（4.9)配制成混合标准储备液。使得混合标准储备液中杆菌肽A、粘杆菌素和维吉尼霉素 M1 的浓度分别为50 μg/mL、12.5μg/mL、10 μg/mL，于 4℃避光保存。4.14混合标准工作液：根据需要用0.1%甲酸-甲醇溶液（4.9)将混合标准储备液(4.13)逐级稀释，配成一系列混合标准工作液，于 4℃避光保存。4.15固相萃取柱：Waters oasis HLB柱,500 mg,6 mL,或相当者。4.16微孔滤膜：0.45μm，有机相。5仪器和设备高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源。5.15.2分析天平：感量分别为0.1mg和0.01g。组织捣碎机。5.35.4 均质器:10 000 r/min。5.5离心机:8 500 r/min。5.6旋涡混合器。5.7固相萃取装置。氮吹仪。5.8具塞离心管:聚丙烯,50mL5.96试样制备与保存6.1 猪肉、猪肝和猪肾取猪肉、猪肝和猪肾的可食部分约500.g代表性样品，用组织捣碎机充分捣碎，均分成两份，分别装人洁净容器中，密封，并标明标记！6.2　牛奶取约500g样品，充分均匀，均分成两份，分别装人洁净容器中，密封，并标明标记。6.3样品保存猪肉、猪肝和猪肾试样于一18℃下冷冻避光存放;牛奶试样于 4℃下避光存放。试样制备与保存过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。7 测定步骤7.1提取7. 1.1 肌肉、肝脏、肾脏样品称取 5g试样(精确到0.01g)于50mL具塞塑料离心管(5.9)中,加人0.1%甲酸-甲醇溶液（4.8)20 mL,均质 2 min 后,4℃下 8 000 r/min 离心10 min。转移