SNT 1940-2007进出口食品中赭曲霉毒素A的测定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1940-2007进出口食品中赭曲霉毒素A的测定方法Determination of ochratoxin A in foods for import and export2007-08-06 发布2008-03-01实施O中华人民共和国发B105空询发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪， SN/T 1940—2007言前本标准的附录 A为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局、北京中检维康技术有限公司、上海博尼生物科技有限公司。本标准主要起草人：褚庆华、郭德华、王敏、王雄、沈建英。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1940—2007进出口食品中赭曲霉毒素A的测定方法1范围本标准规定了免疫亲和柱层析净化高效液相色谱法和荧光光度法测定食品中赭曲霉毒素A的方法。本标准仲裁法适用于小麦、大麦、玉米、葡萄酒、黄酒、啤酒、葡萄干、胡椒粒/粉中赭曲霉毒素A的测定。本标准快速法适用于小麦、大麦、玉米、白葡萄酒、黄酒、啤酒、葡萄干、白胡椒粒/粉中赭曲霉毒素A的测定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用为本标旌的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修改版均不适用于本标准，然而鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注且期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格箱试验方法GB/T18979食品中黄曲霉葬素的测定免疫亲和偿析净花高效液相色谱法和荧光光度法SN/T0800.1进出口粮油、料检验抽样和制样方法SN/T 0961 进出口葡萄于检验方法3样品制备3.1样品数量3.1.1小麦、大麦、玉米：原始样品数量应查少于/4kg，按照SN/T08p0.1的规定缩分至1kg作为试验样品。3.1.2胡椒粒/粉、葡萄干：样品量应衣少于If kg.1 d00 mL..3.1.3葡萄酒、黄酒、啤酒：样品量应不炒于3.2样品制备3.2.1小麦、大麦、玉米、胡椒粒：粉碎机（4.3.2)全部粉磷并通过虹mm圆孔筛。粉碎试样置于广口瓶中混匀备用并标明标记。3.2.2葡萄于：按照SN/T0961的规定制备。粉碎试样置手广口瓶中混匀备用并标明标记。3.2.3啤酒：使用前置于0℃～4℃冰箱冷藏rh,启盖，倒人锥形瓶中在振荡器（4.3.3)上振摇至泡沫消失。以塑料薄膜封口备用并标明标记。3.2.4试样在制备过程中，应防止样品受到污染。4免疫亲和柱层析净化高效液相色谱法(仲裁法）4.1方法提要试样经过甲醇十水溶液或碳酸氢钠溶液提取，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有赭曲霉毒素A特异抗体的免疫亲和柱层析净化，以甲醇洗脱，洗脱液供带有荧光检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量。4.2试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682中二级用水要求。1 SN/T 1940—20074.2.1 甲醇:HPLC级。4.2.2聚乙二醇（polyethylene glycol,分子量8000）。4.2.3氯化钠。4.2.4碳酸氢钠。4.2.5磷酸氢二钠。4.2.6磷酸二氢钾。4.2.7氯化钾。4.2.8浓盐酸。4.2.9[吐温-20(Tween-20)。4.2. 10乙腈：HPLC级。4.2. 11磷酸钠。4.2. 12十六烷基三甲基溴化铵(C-tab)。4.2.13甲醇+水(8+2):取80mL甲醇(4.2.1)加20 mL水。4.2.14聚乙二醇-碳酸氢钠溶液：溶解10g聚乙二醇（4.2.2）、50g碳酸氢钠（4.2.4）于约950ml.水中,并用水稀释到1 L。4.2.15碳酸氢钠溶液：称取1g碳酸氢钠（4.2.4），用水溶解并稀释到100ml。4.2.16氯化钠-碳酸氢钠溶液：溶解25g氯化钠（4.2.3）、5g碳酸氢钠（4.2.4）于约950mI.水中，并用水稀释到 1 L。4.2.17磷酸缓冲溶液(PBS)：称取8.0g氯化钠（4.2.3）、1.2g磷酸氢二钠（4.2.5）、0.2g磷酸二氢钾(4.2.6)和0.2g氯化钾（4.2.7)溶解于约900ml.水中，用浓盐酸（4.2.8)调节pH至7.0，用水稀释至1 L.4.2.18淋洗缓冲液A：称取25g氯化钠（4.2.3）、5g碳酸氢钠（4.2.4)溶于水中，加人0.1mL吐温-20（4.2.9），用水稀释至1L。4.2.19淋洗缓冲液B:在1000mI.磷酸缓冲溶液（4.2.17)中加人1.0mL吐温-20(4.2.9）。4.2.20磷酸钠溶液:0.012 mol/L,调节 pH至7.5。4.2.21赭曲霉毒素A标准品：纯度大于99%。4.2.22赭曲霉毒素A标准储备