deae纤维素柱层析多糖原理.docxVIP

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DEAE纤维素柱层析是一种常用的离子交换色谱技术,用于多糖的分离和纯化。其原理基于离子交换体对溶液中带电离子的吸附和解吸作用。 具体原理如下: 1. DEAE纤维素柱:DEAE纤维素是一种带有正电荷的离子交换介质,具有许多二级胺基团。这种柱材与带负电荷的多糖分子发生静电相互作用。 2. 样品加载:将混合溶液中含有多糖的样品加载到DEAE纤维素柱上。多糖与柱子表面的二级胺基团之间发生静电作用,带负电荷的多糖被柱子捕获。 3. 洗脱梯度:通过改变洗脱缓冲液的离子强度或pH值,使得多糖以不同的速率从柱子上洗脱。一般采用梯度洗脱,即逐渐增加洗脱缓冲液中的盐浓度或调节pH值,以逐步将多糖从柱子上解吸下来。 4. 分离和纯化:根据多糖在DEAE纤维素柱上的亲和性差异,它们在洗脱梯度中以不同的速率逐渐分离。带有较低亲和性的多糖会被较早洗脱,而带有较高亲和性的多糖则会在较高盐浓度或pH值条件下才从柱子上洗脱。 通过DEAE纤维素柱层析,可以实现多糖的粗分离和初步纯化。这种方法可用于生物医药、食品工业等领域中对多糖的分离、纯化和研究。

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