NY_T 3188-2018鸭浆膜炎诊断技术.pdf

ICS 11.220B 41NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3188—2018鸭浆膜炎诊断技术Diagnostic techniques for duck serositis2018-06-01实施2018-03-15发布中华人民共和国农业部发布 NY/T 3188—2018前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草.本标准由农业部兽医局提出。本标准由全国动物卫生标准化技术委员会（SAC/TC181)归口。本标准起草单位：中国农业科学院兰州兽医研究所。本标准主要起草人：郑福英、刘永生、陈启伟、宫晓炜I NY/T 3188—2018引言鸭浆膜炎是由鸭疫里默氏杆菌（Riemerellaanatipestifer）引起的一种鸭的接触性传染病，又称为新鸭病、鸭败血症、鸭疫综合征、鸭疫巴氏杆菌病等。该病多见于1周龄～8周龄的维鸭，呈急性或慢性败血症，临诊上主要表现为精神沉郁，采食量下降，眼和鼻分泌物增多，头颈震颤或歪斜，共济失调。检眼观病变为纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎，部分病例出现关节炎，常引起维鸭大批发病和死亡，目前已成为危害鸭养殖业的一种最常见的细菌病。鉴于目前我国关于鸭传染性浆膜炎的标准化诊断技术还是空白，因此我们制定了该标准，以便有效地诊断和监控该病。Ⅱ NY/T 3188—2018鸭浆膜炎诊断技术1范围本标准规定了鸭浆膜炎的临床诊断和实验室诊断技术要求。本标准适用于鸭浆膜炎的诊断。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB19489实验室生物安全通用要求。NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范。3生物安全措施进行鸭浆膜炎实验室诊断时，如细菌分离、核酸提取等，按照GB/T19489的规定执行；样品采集、保存与运输按照NY/T541的规定执行。4临床诊断4.1流行特点4.1.11周龄～8周龄的鸭均易感，但以2周龄～3周龄的维鸭最易感4.1.2本病主要经呼吸道或通过皮肤伤口感染而发病。4.1.3饲养管理不良，如密度过大，空气不流通，潮湿，过冷或过热，饲料中缺乏维生素、微量元素或蛋白质等均可诱发该病。4.1.4本病的感染率有时可达90%以上，患病鸭的死亡率从5%至75%不等。4.2临床症状4.2.1急性病例多见于2周龄～3周龄雏鸭。病鸭表现为倦怠，缩颈，不愿走动或行动迟缓，采食量下降。眼、鼻有分泌物。濒死前出现神经症状，头颈震颤，角弓反张，不久抽搐而死。4.2. 1.5病程一般 1 d~3 d。4.2.2慢性病例多见于4周龄～7周龄的鸭。病鸭精神沉郁，食欲降低病鸭共济失调，痉挛性点头或摇头摆尾，前仰后翻，呈仰卧姿态，有时头颈歪斜，做转圈或倒退运动，最后衰竭死亡病程达1周或1周以上。4.3剖检病变4.3.1纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎。1 NY/T3188—20184.3.2慢性病例常见胫跖关节及踏关节肿胀，切开见关节液增多。4.4结果判定符合4.1中的某些流行特点，病鸭出现4.2中的临床症状和4.3中的眼观病变,可判断为疑似鸭浆膜炎。5实验室诊断5.1样品采集与运输5.1.1样品采集样品数量每个发病鸭群最少选择5只病鸭采集样品。血清选择具有临床症状的活鸭，从颈静脉或翅静脉无菌采集血液1mL～2mL,用常规方法分离血清。组织若为活鸭，从颈动脉放血处死，无菌采集其脑、心脏和肝脏组织，分别放人无菌带有螺旋盖的离心管中。若为死亡鸭，则直接无菌采集其脑、心脏和肝脏组织。5.1.2样品的运输与储存样品采集后，置于冰上冷藏送至实验室。血清和病料组织冻存于一20℃以下。5.2鸭疫里默氏杆菌分离鉴定5.2.1仪器电子天平，光学显微镜，组织破碎仪，低温高速离心机，恒温培养箱。5.2.2耗材载玻片，枪头，无菌2mL和5mL离心管，一次性培养皿。5.2.3试剂灭菌双蒸水或去离子水，胰蛋白陈大豆培养基，胰蛋白陈大豆琼脂培养基，绵羊抗凝血，小牛血清，商品化细菌生化鉴定管，磷酸盐缓冲液(PBS,0.01mol/L,pH7.2)。相关试剂配制方法见附录A。5.2.4样品处理无菌取鸭的脑、心脏、肝脏组织0.5g~1g，分别放人5mL容量的无菌离心管中，在天平上称量所取病料组织的重量（离心管的重量在加入组织前已经称量）。以2mL/管加人PBS(0.01mol/L,pH7.2)，以50Hz在组织破碎仪内研磨3min。吸取100μL组织混悬液，放人2mL容量的无菌离心管中，用适量PBS(0.01mol/L，pH7.2)稀释至1：10(w），混匀后取100uL作为接种材料。5.2.5细菌分离将100μL组织混悬液涂布于胰蛋白陈大豆琼脂（含5%绵羊血)平板上，倒置放于5%CO2培养箱中，37℃培养20h～24h