杀鲑气单胞菌.doc

杀鲑气单胞菌 ICS 65(020(30 41B 雷雪 共和,，、II7?1 国国家中华人民 标准 1 5805(6—2008 GB,T 15805(1—1995 部分代替GB,T 鱼类检疫方法 第6部 分:杀鲑气单胞菌 fish— methods of Quarantine Part salmonicida6:Aeromonas 2008—11—0 1实施 1发布 2008—07—3 丰瞀鬻鬻瓣訾矬瞥星发中布 国国家标准化管理委员会“”。 15805(6—2008 GB,T 刖 罱 GB,T 15805((鱼类检疫方法》分为下列部分: 一一第1部分:传染性胰脏坏死病毒(IPNV); ——第2部分:传染性造血器官坏死病毒(IHNV) ——第3部分:病毒性出血性败血症病毒(VHSV) ——第4部分:斑点叉尾鲴病毒(CCV); ——第5部分:鲤春病毒血症病毒(SVCV); ——第6部分:杀鲑气单胞菌; ——第7部分:脑粘体虫; 本部分为GB,T 15805的第6部分。 15805(1 本部分代替GB,T 1995《淡水鱼类检疫方法第一部分》中的第8章。 15805(1 本部分与GB,T 1995的第8章相比主要变化如下: ——删去临床检查; ——用国际通用的API鉴定系统来判断杀鲑气单胞菌，代替原来简单用几个生化鉴定结果来判定 的方法; 一——增加附录“杀鲑气单胞菌各亚种的生化特性表”; 1(1 2000的规定，作为部分编写。 一,结构格式按GB,T 本部分的附录A为规范性附录。 本部分由中华人民共和国 农业部提出。 本部分由全国水产标准化技术委员会归口。 本部分起草单位:农业部全国水产技术推广总站、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。 本部分主要起草人:孙喜模、江育林、陈爱平、陈辉、朱泽闻。 本部分所代替标准的历次版本 发布情况为: 15805(1 1995(——GB,T 15805(6—2008 GB,T 鱼类检疫方法 第6部分: 杀鲑气单胞菌 1范围 GB,T 15805的本部分规定了用细菌分离和生化鉴定的方法检测疖疮病病原——杀鲑气单胞菌的 方法。 本部分适用于杀鲑气单胞菌的分离及鉴定，疖疮病的流行病学调查、诊断、监测，以及El岸出入 境、 国内跨区域移动的鱼类检疫。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过GB,T15805的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日 期的引用文件， 其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。 6682 GB,T ISO 3696:1987)1992分析实验室用水规格和试验方法(neq 18088 GB,T 2000出入境动物检疫采样 3试剂和材料 6682 3(1水:GB,T 1992，二级。 3(2杀鲑气单胞菌参考菌株:由农业部指定的动物病原微生物菌(毒)种保藏机构提供。3(3 APl20NE试剂条:4?保存。按照说明书指示的方法使用。 3(4革兰氏染色液:按说明书指示的方法使用。 3(5 TSA培养基:按说明书指示的方法配制。 3(6氧化酶试纸:按说明书指示的方法使用。 4器材和设备 4(1恒温培养箱。 4(2离心机和离心管。 4(3显微镜(具油镜、暗视野)、载玻片、盖玻片。 4(4普通冰箱和低温冰箱。 4(5剪刀、镊子、接种环、培养皿等。 5杀鲑气单胞菌的分离 5(1取样 18088 按GB,T 2000规定执行。如果鱼体有红肿渍疡，用解剖刀切开患部(或溃疡部)，将干净的 载玻片贴紧病灶并挤压，加1滴,2滴生理盐水后盖上盖玻片，400倍,600倍镜检菌体形态和运动状 态，并做革兰氏染色。 若鱼体表无任何症状，则需从肾中分离细菌。 5(2选择性培养基分离 将样品接种到TSA培养基，25?培养72 h。TSA上会生长白色的菌落(注意:有的亚种会产生水 1 15805(6—2008 溶性褐色素如杀鲑亚种，而其他亚种没有色素产生)。如果在TSA平板中加入GB,T mg,I，的考马斯亮100 兰，则生长的菌落为深蓝色。 5(3细菌鉴定 5(3(1 革兰氏染色和形态观察 革兰氏染色后，菌体呈红色表示革兰氏阴性;菌体呈紫色表示革兰氏 阳性。该菌应为革兰氏阴性 菌，短杆状。 5(3(2运动性观察 h,24 取干净的载玻片，滴1滴,2滴生理盐水。用接种环从斜面上挑培养12 h的菌落涂抹在水 滴中，盖上盖玻片。400倍,600倍镜检菌体形态和运动状态。细菌能快速运动或产生位移的，为有运 动性;细菌在原地来回颤动的(即布朗运动)，为没有运动性。该菌应不运动。 5(3(3氧化酶试