DB35T 1514-2015农产品中白藜芦醇的测定 高效液相色谱法.docxVIP

ICS 11.120.10 C 15 福 建 省 地 DB35 方 标 准 DB35/T 1514—2015 农产品中白藜芦醇的测定 高效液相色谱法 Determination of resveratrol in agricultural products High performance liquid chromatography method 2015-06-26 发布 2015-09-26 实施 福建省质量技术监督局 发 布 I DB35/T 1514—2015 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由福建省农业科学院提出。 本标准由福建省农业厅归口。 本标准起草单位：福建省农科院中心实验室 本标准主要起草人：潘葳、涂杰峰、刘文静、罗钦。 1 DB35/T 1514—2015 农产品中白藜芦醇的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了农产品中白藜芦醇含量的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于花生衣、葡萄皮、苜蓿、虎杖、藜芦等农产品中白藜芦醇含量的测定。 本标准方法测定花生衣、葡萄皮、苜蓿中白藜芦醇含量的检出限均为0.6 μg/g，定量限均为2.0 μg/g； 虎杖、藜芦中白藜芦醇含量的检出限均为7.5 μg/g，定量限均为25 μg/g。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法。 3 原理 用乙醇-水溶液提取试样中的白藜芦醇，提取液离心后，取上清液，经微孔滤膜过滤，高效液相色 谱-紫外检测法测定，外标法定量。 4 试剂和材料 除另有规定，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T 6682-2008中一级要求。 4.1 无水乙醇(C2H6O)。 4.2 甲醇(CH4O)：色谱纯。 4.3 乙腈(C2H3N)：色谱纯。 4.4 冰醋酸(C2H4O2 )。 4.5 85%乙醇溶液：取 850 mL 无水乙醇(4.1)，加 150 mL 水，混匀。 4.6 白藜芦醇标准品(CAS 501-36-0，反式)：纯度≥99% (质量分数)。 4.7 0. 1%乙酸溶液：取 1.0 mL 冰醋酸(4.4)，用水稀释并定容至 1000 mL。 4.8 流动相：将 26 体积乙腈(4.3)与 74 体积 0. 1%乙酸溶液(4.7) 混合。使用前经微孔滤膜(5.9) 过滤并脱气。 4.9 白藜芦醇标准储备液(500 μg/mL)：称取 50 mg (精确至 0.1 mg) 白藜芦醇标准品(4.6)，置于 100 mL 容量瓶(5.11) 中，用甲醇(4.2) 溶解并定容至刻度， 配制成浓度为 500 μg/mL 的标准储备液， 2 ℃~8 ℃避光保存，有效期 2 个月。 4.10 白藜芦醇标准工作液： 分别准确移取 0.01 mL 、0.05 mL、0.1 mL、0.5 mL 、1.0 mL 白藜芦醇标准 储备溶液(4.9)于不同的 50 mL 容量瓶(5.11)中，用流动相溶液(4.8) 稀释并定容至刻度，摇匀， 得到不同浓度的白藜芦醇标准工作溶液(质量浓度分别为 0.1 μg/mL 、0.5 μg/mL 、1 μg/mL 、5 μg/mL 、 10 μg/mL) ，即配即用。 2 DB35/T 1514—2015 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。 5.2 电子天平：感量 0.1 mg。 5.3 电热鼓风干燥箱：温度可控制。 5.4 粉碎机：高速万能粉碎机，转速 24 000 r/min ，或相当的设备。 5.5 涡旋振荡器。 5.6 超声波清洗器：功率不低于 250 W ，或相当的设备。 5.7 离心机型号 1：体积 50 mL，转速不低于 4 000r/min 或相当的设备； 5.8 离心机型号 2：体积 2 mL，转速不低于 10 000 r/min 或相当的设备。 5.9 微孔滤膜： 0.22 μm，直径 25 mm 的聚砜膜或相当者。 5.10 离心管： 50 mL (螺旋盖)， 1 mL。 5.11 容量瓶： 100 mL 、50 mL (棕色)。 5.12 分样筛：筛网孔径为 250 μm。 6 分析步骤 以下操作尽可能避免阳光直射。 6.1 样品前处理 6.1.1 试样制备 将花生衣、葡萄皮、苜蓿、虎杖、藜芦等样品置于干燥箱(5.3)中， 60 C恒温干燥至恒重，冷却 至室温后，分取样品约100