DB35T 1596-2016红掌组织培养育苗技术规程.docxVIP

福建省质量技术监督局 发 布 ICS 65.020.20 B61 福 建 省 地 DB35 方 标 准 DB35/T 1596—2016 红掌组织培养育苗技术规程 Technical regulation of tissue culture for Anthurium andraeanum 2016 - 08 - 22 发布 2016 - 11 - 22 实施 I DB35/T 1596—2016 目 次 前 言 II 1 范围 1 2 外植体 1 3 培养基 1 4 接种 3 5 诱导培养 4 6 增殖培养 4 7 生根培养 4 8 培养室环境维护 5 9 移栽与苗期管理 5 10 技术档案 6 附录 A(资料性附录) 红掌组织培养培养基配方 7 附录 B(资料性附录) 红掌病虫害防治方法 8 参 考 文 献 9 II DB35/T 1596—2016 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由福建省林业厅提出并归口。 本标准负责起草单位：福建省林业科技试验中心。 本标准主要起草人： 陈孝丑、陈春、高小坤、张毅智、江瑞荣、李秀娟、张月娇、朱育端、徐建球。 1 DB35/T 1596—2016 红掌组织培养育苗技术规程 1 范围 本标准规定了红掌(Anthuriumandraeanum) 组织培养育苗技术的外植体、培养基、接种、诱导培 养、增殖培养、生根培养、培养室环境维护、移栽与苗期管理和技术档案的要求。 本标准适用于红掌组织培养育苗生产。 2 外植体 2.1 母本管理 母本植株应种植在温室大棚内，加强肥水管理，预防病虫害。 2.2 外植体选择 选择性状优良、生长健壮的植株幼嫩叶片及叶柄作为外植体，幼嫩叶片以卷曲阶段为最佳材料。 2.3 表面消毒 2.3.1 清洗 外植体用0.1 % ~0.3 %(m/v) 洗衣粉溶液浸没并振荡5 min ~10 min， 然后用自来水冲洗30 min ~ 60 min。 2.3.2 消毒 在超净工作台中，用75 %(v/v)酒精浸泡外植体8 s ~10 s，立即倒净酒精后用无菌水冲洗。再 用0.1 %(m/v) HgCl2加4~5滴吐温-20浸泡，不断轻摇10 min ~15 min，然后用无菌水冲洗4~6次， 每次1 min ~2 min，沥干水分。 3 培养基 3.1 培养基选择 3.1.1 基本培养基 MS培养基(Murashige和Skoog， 1962年)。 3.1.2 培养基种类 培养基分为诱导培养基、分化培养基、继代增殖培养基和生根培养基。 3.1.3 培养基配方 培养基配方见附录A。 2 DB35/T 1596—2016 3.2 母液配制 3.2.1 母液 包括大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液、有机营养成分母液和植物生长调节物质母液。 3.2.2 浓度 与培养基的组分浓度相比较，不同母液配制的浓度为: a) 大量元素母液配制成 10~20 倍； b) 微量元素母液配制成 100~ 200 倍； c) 铁盐母液配制成 100 倍； d) 有机营养成分母液配制成 100~ 200 倍； e) 植物生长调节物质母液浓度配制成 0.1 mg/L ~1.0 mg/L。 3.2.3 试剂纯度 配制培养基所用试剂纯度为化学纯以上。 3.2.4 配制用水 用去离子水配制。 3.2.5 储藏 微量元素母液、铁盐母液、植物生长调节物质母液置于4 ℃的冰箱中， 铁盐母液用棕色瓶储藏， 储 藏时间不超过1个月。若有沉淀、结晶、微生物和藻类生长应废弃不用。 3.2.6 标签 母液储藏容器贴上标签，标明名称、浓度、配制日期和配制人。 3.3 培养基配制 3.3.1 称量 依照培养基配方，量取所需体积60 % ~70 %的配制用水，按比例添加母液、固化剂和糖，将培养 基定容至最终体积。 3.3.2 pH 值 用1.0 mol/L盐酸或1.0 mol/L氢氧化钠调整培养基pH值至5.80。 3.3.3 分装 将培养基分装到培养容器内，培养基厚度为1.0 cm~1.2 cm，避免培养基沾到培养容器口。 3.3.4 标签 培养基分装、加盖、封口后，贴好标签，标明名称、配制日期和配制人。 3.4 培养基灭菌 3.4.1 灭菌 3 DB35/T 1596—2016 培养基分装后采用高压蒸汽灭菌器进行湿热灭菌，灭菌压力为0.1 Mpa，温度为121 ℃，灭菌时间 为15 min~20