DB36_T 1744-2023-柑橘裂皮病和柑橘碎叶病RT-PCR检测技术规程.pdfVIP

ICS 65.020.01 CCS B 16 DB36 江 西 省 地 方 标 准 DB36/T 1744—2023 柑橘裂皮病和柑橘碎叶病 RT-PCR检测技术 规程 Technical specification for detecting Citrus exocortis and Citrus tatter leaf by RT-PCR 2023 - 02 - 10发布 2023 - 08 - 01实施 江西省市场监督管理局 发 布 DB36/T 1744—2023 前 言 本文件按照GB/T 1.1-2020给出的规则编写。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由赣州市市场监督管理局提出并归口。 本文件起草单位：赣南师范大学、国家脐橙工程技术研究中心、赣州市果业发展中心、江西省农业 农村产业发展服务中心。 本文件主要起草人：卢占军、陈红丽、黄爱军、胡珊玲、谢金招、余海中、钟八莲、姚锋先、苏华 楠、易龙、胡威、朱博、王希、曾芳群、陈奕芳、谢廉颉、陈慈相。 II DB36/T 1744—2023 柑橘裂皮病和柑橘碎叶病 RT-PCR检测技术规程 1 范围 本文件规定了柑橘裂皮病和柑橘碎叶病的术语和定义、样品采集、样品RNA制备、RNA提取质量评价、 RT-PCR检测、电泳及成像分析、结果判定、检测后样品的处理。 本文件适用于柑橘类植物材料中疑似感染柑橘裂皮病或柑橘碎叶病的病原检测和病害鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅注明日期的版本适用于本 文件。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 37874-2019 核酸提取纯化方法评价通则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 柑橘裂皮病 Citrus exocortis disease 由柑橘裂皮病类病毒引起的柑橘病害，参见附录A。 3.2 柑橘碎叶病 Citrus tatter leaf disease 由柑橘碎叶病毒引起的柑橘病害，参见附录B。 3.3 柑橘裂皮病的病原 Citrus exocortis viroid (CEVd) 一种类病毒，没有蛋白质衣壳，是游离的低分子量核糖核酸（RNA），病原可通过嫁接、修剪工具 传播。 3.4 柑橘碎叶病的病原 Citrus tatter leaf virus（CTLV） 发状病毒属，病毒粒子为曲杆状，基因组是单链正义RNA分子，病原可通过嫁接、机械和菟丝子传 播。 3.5 1 DB36/T 1744—2023 反转录-聚合酶链式反应 RT-PCR 经反转录酶的作用从RNA合成cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。