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【尝试解答】　(1)反转录酶(或逆转录酶)　分解RNA (2)稳定 (3)DNA聚合酶　催化⑤过程的酶耐高温 (4)60 第二十六页，共四十三页，2022年，8月28日 【解析】　根据图示可以看出，该过程是RNA在逆转录酶的催化作用下形成cDNA(负链DNA)，构成RNA—DNA中间体。中间体中的RNA再经过RNA酶H水解，而以剩下的负链DNA复制成双链DNA的过程。①过程是由RNA合成DNA的过程，需要逆转录酶进行催化。②过程是以单链DNA复制获得双链DNA的过程需要DNA聚合酶催化。⑤属于双链DNA复制的过程，需要DNA聚合酶催化。⑤过程在70～75 ℃环境下进行，所需要的酶应该能够耐高温。 第二十七页，共四十三页，2022年，8月28日 【互动探究】　(1)上述过程中需要限制酶和DNA连接酶吗？ (2)由mRNA逆转录形成的DNA具有启动子吗？ 【提示】　(1)不需要。　(2)无。 【探规寻律】　(1)PCR技术不需要解旋酶，但需利用90～95 ℃高温使DNA分子解旋。 (2)PCR技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。 (3)PCR技术是对已知目的基因的扩增；从基因库中获取目的基因，是先找出含有目的基因的细胞，再通过一定的技术手段获取目的基因。 第二十八页，共四十三页，2022年，8月28日 基因表达载体的构建和导入受体细胞 1．基因表达载体的构建 第二十九页，共四十三页，2022年，8月28日 特别提醒 ①用限制酶切割载体和含目的基因的DNA分子时，可以使用不同的限制性核酸内切酶,但是必须切出相同黏性末端。 ②不同基因可以拼接的原因：不同生物的基因具有相同的结构和化学组成，都是双螺旋结构，都由四种脱氧核糖核苷酸组成，都遵循相同的碱基互补配对原则：A—T，G—C。 第三十页，共四十三页，2022年，8月28日 2．目的基因的导入 (1)不同受体细胞的常用导入方法 生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法 显微注射法 Ca2＋处理法 受体细胞 体细胞 受精卵 原核细胞 第三十一页，共四十三页，2022年，8月28日 返回 返回 高二生物基因工程的基本操作程序 第一页，共四十三页，2022年，8月28日 课标领航 1．阐述基因工程的原理。 2．掌握并理解基因工程的基本操作程序。 3．尝试设计某一转基因生物的研制过程。 【重点】　基因工程的原理及基本操作程序。 【难点】　基因文库；PCK扩增过程；目的基因的检测。 第二页，共四十三页，2022年，8月28日 看到这幅图，联系基因工程，你有何感想？让植物和动物合为一体可能不好实现，但我们能不能通过基因工程技术，让这一愿望实现呢？实际上，基因工程技术已经实现了人们的许多看似异想天开的愿望或构想。 情景导航 第三页，共四十三页，2022年，8月28日 核心要点突破 基础自主梳理 知能过关演练 1．2　 基 因 工 程 的 基 本 操 作 程 序 第四页，共四十三页，2022年，8月28日 基础自主梳理 一、基因工程的基本操作程序 1．目的基因的获取。 2．______________的构建。 3．将目的基因导入_________。 4．目的基因的检测与鉴定。 基因表达载体 受体细胞 第五页，共四十三页，2022年，8月28日 二、目的基因的获取 1．目的基因：主要是指编码________的结构基因。 2．获取方法 (1)从基因文库中获取 ①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多______片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。 蛋白质 DNA 第六页，共四十三页，2022年，8月28日 所有 第七页，共四十三页，2022年，8月28日 思考感悟 1．怎样从基因文库中得到我们需要的目的基因？ 【提示】　可以根据目的基因的有关信息，例如，根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA，以及基因的翻译产物蛋白质等特性来获取目的基因。 第八页，共四十三页，2022年，8月28日 (2)利用PCR技术扩增目的基因 含义 一项在生物体外___________________的核酸合成技术 原理 DNA_________ 前提条件 有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成______ 扩增过程 目的基因DNA受热→变性解旋为_____→引物与单链相应互补序列结合→在_____________作用下延伸→形成新的DNA分子→循环重复以指数形式扩增 结果 以指数形式扩增：2n 复制特定DNA片段 双链复制 引物 单链 DNA聚合酶 第九页，共四十三页，2022年，8月28日 (3)人工合成法：如果基因较小，核苷酸序列又已知，可以通过DNA合成仪用化学方法直接人