蛋白质的修饰和表达.pptxVIP

 蛋白质的修饰和表达;第一节 蛋白质修饰的化学途径;一、功能基团的特异性修饰;一、功能基团的特异性修饰; 1．多位点取代; 2．限制性取代 ; 3．次级取代; 二、基于蛋白质片段的嵌合修饰;二、基于蛋白质片段的嵌合修饰; 第二节 蛋白质改造的分子生物学途径;基因突变技术是通过在基因水平上对其编码的蛋白质分子进行改造，在其表达后用来研究蛋白质结构功能的一种方法。 根据其特点，可将基因突变分为两大类：位点特异性突变和随机突变。 位点特异性突变又可大体分为三种类型：一类是通过寡核苷酸介导的基因突变；第二类是盒式突变或片段取代突变；第三类是利用聚合酶链反应(PCR)，以双链DNA为模板进行的基因突变。 可以这样说，PCR技术的出现为基因的突变，基因的剪接开辟了一条极其有效、极其快捷的道路。当然无论哪种方法都可以在为蛋白质编码的基因序列上产生插入、缺失、取代等突变。; 1．编码基因的专一性位点突变; (2) 几种寡核苷酸介导的基因突变方法 ; 2．区域性定向突变;研究目的;二、基因融合和基因剪接;基因融合的用途; 第三节 重组蛋白质的表达; 一、大肠杆菌中表达体系的优点;大肠杆菌表达体系的缺点;大肠杆菌表达体系的应用;1．表达载体的一般特点;2．与外源基因有效表达的相关因素; 3．改善表达水平的方法 ;4. 改善外源蛋白溶解性的方法 ; 二、目标蛋白质在酵母细胞中的表达