犬腺病毒pVAX1-Loop核酸疫苗的构建、表达和免疫的开题报告.docxVIP

犬腺病毒pVAX1-Loop核酸疫苗的构建、表达和免疫的开题报告 一、研究背景 犬瘟、犬细小病毒和犬病毒性肝炎是犬类最为严重的传染性疾病，其中犬瘟是犬类最具病害性与病死率的病毒性疾病之一，病死率可达50-80%。目前，疫苗是预防病毒性疾病最为有效的手段之一。传统疫苗的制备方法不仅需要使用病毒分离、培养、灭活等复杂工艺，而且经常出现较大的安全隐患，因此需要寻找一种更为安全、高效的疫苗制备方法。 二、研究目的 本研究旨在构建一种能够有效预防犬类病毒性疾病的DNA疫苗，通过对犬腺病毒的Loop区域进行基因工程改造，构建pVAX1-Loop核酸疫苗，并探讨其在小鼠体内的表达和免疫效果。 三、研究内容 1.构建犬腺病毒pVAX1-Loop核酸疫苗 将犬腺病毒表面结构蛋白中的Loop区域进行基因工程改造，将其克隆至pVAX1载体中，构建pVAX1-Loop核酸疫苗，并进行酶切、测序等质控。 2.小鼠体内表达 将pVAX1-Loop核酸疫苗转染至小鼠体内，通过Western blot、RT-PCR等检测方法检测其表达情况。 3.小鼠体内免疫效果 将pVAX1-Loop核酸疫苗注射至小鼠体内，观察其免疫效果，如抗体水平、细胞免疫反应等。 四、预期成果 本研究通过基因工程改造构建出能够预防犬类病毒性疾病的DNA疫苗，并且在小鼠体内得到良好表达和免疫效果，为犬类病毒性疾病的预防提供了一种新的思路和方法。