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重组腺病毒构建，扩增及纯化根本技术操作
— 目的基因的克隆〔以 pshuttle-CMV 质粒为例〕
选择适当酶切位点，进展酶切连接，将目的片段插入pshuttl-CMV 质粒多克隆位点。
重组质粒鉴定： 酶切鉴定或测序。
重组质粒扩增，纯化并预备适量含目的基因的穿梭质粒。
用 PmeI 单酶切线性化重组穿梭质粒，电泳鉴定质粒完全被切开。
胶回收线性化质粒，以备共转化使用。二 共转化
1 大肠杆菌 BJ5183 电转感受态制备
2 从颖琼脂板上挑取单个BJ5183 细菌，接种于LB 培育基中，37℃振摇过夜。
2 接种 25ml 过夜培育物于 500ml LB 培育基，37℃振摇，至OD
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