酶的提取与分离纯化.pptVIP

第三章 酶的提取与别离纯化 ★酶的提取根本概况 ★离心法酶的别离纯化; 2、沉淀别离〔根据溶解度的不同〕提取 特点:使溶液中的溶质由液相转变为固相析出 古老、实用、简单的初步别离方法 生物大分子制备中常用沉淀方法： 1 中性盐沉淀〔盐析法〕 2 有机溶剂沉淀 3 选择性沉淀〔热变性和酸碱变性〕 4 等电点沉淀 5 有机聚合物沉淀; 2.1 盐析沉淀法〔改变离子强度〕 ①根本原理〔盐溶和盐析〕:向蛋白质或酶的水溶液中 参加中性盐，可产生两种现象： ●盐溶〔salting in〕 ： 低浓度的中性盐增加蛋白质的溶解度。 ●盐析〔salting out〕 ： 高浓度的中性盐降低蛋白质的溶解度。;蛋白质的盐析; 原因： 高盐浓度下盐离子与蛋白质分子争夺水分子，除去蛋白质的水合外壳，降低溶解度而沉淀。 不同蛋白质分子量、外表电荷不同，在不同盐浓度下沉淀，逐渐增大盐浓度，不同蛋白