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利用基因敲放技术建立胰岛β细胞特异表达的Cre重组酶转基因小鼠模型的中期报告 概述： Cre/loxP系统是目前最常用的基因敲除或定向表达技术之一。该系统依赖于Cre重组酶（Cre recombinase）催化单链DNA断裂与剪接酶的活性，从而使得在含有loxP位点的DNA段发生重组，引起DNA删除、PRSS或转位。 胰岛β细胞特异表达的Cre重组酶转基因小鼠模型可以用于探究胰岛β细胞特异基因的作用及相关疾病的发生机制研究。 本文介绍基于遗传背景不同、基因型不同的C57BL/6小鼠和FVB小鼠分别进行Cre/loxP系统构建胰岛β细胞特异表达Cre酶的转基因鼠模型的中期实验结果。 实验设计： 1. 构建目标序列 选取胰岛素基因启动子片段作为特异表达载体载体，构建Cre重组酶基因与胰岛素基因启动子完全融合的慢病毒表达载体。 2. 病毒制备 HEK293FT宿主细胞中转染慢病毒表达载体，收集病毒液并浓缩以得到高效感染病毒。 3. 胰岛β细胞培养 选取INS-1-E细胞作为胰岛β细胞模型，以10 MOI的病毒感染培养并筛选得到转基因INS-1-E细胞系。 4. 实验组建 选取C57BL/6小鼠和FVB小鼠作为实验小鼠，将转基因INS-1-E细胞移植于两类小鼠的腹膜腔内，分别进行Cre/loxP重组实验。 中期结果： 1. 成功构建胰岛β细胞特异表达Cre重组酶转基因慢病毒表达载体。 2. 成功制备高效感染INS-1-E细胞的Cre重组酶转基因慢病毒。 3. 成功筛选得到转基因INS-1-E细胞系。 4. 成功建立C57BL/6小鼠和FVB小鼠腹膜腔内移植转基因INS-1-E细胞的实验模型。 5. 目前实验正在进行中，后续将对实验结果进行进一步分析与验证。 结论： 目前的实验中，我们成功进行胰岛β细胞特异表达Cre重组酶的转基因小鼠模型的搭建，建立了实验模型，为我们相关疾病的发生机制研究提供了新的思路与手段。后续实验将继续进行，结果将会进一步验证和分析。