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- 2023-08-28 发布于上海
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TLR4基因的变异分析及TLRs基因与鸡沙门氏菌感染的相关性研究的中期报告
本研究旨在探讨TLR4基因的变异对鸡对沙门氏菌感染的易感性是否存在影响,并研究TLRs基因与鸡沙门氏菌感染的相关性。
研究方法:
1.样本采集:
在养殖场选取20只外观健康的鸡进行血样采集,采用基因提取试剂盒提取DNA。
2.基因分型:
使用PCR扩增TLR4基因的第3外显子,筛选出突变位点,并进行单碱基多态性分型。同时,根据文献报道,选择TLRs基因中的其他位点进行单碱基多态性分型,比如TLR2、TLR3等。
3.沙门氏菌感染模型:
将选取的鸡按体重均分为两组,一组注射含有沙门氏菌的生长培养基,另一组注射生长培养基。分别记录两组鸡的体温、食欲和粪便情况,同时抽取血液样本以及组织样本。
4.基因表达:
利用RT-qPCR技术检测TLRs基因在沙门氏菌感染组和对照组中的表达情况。
结果分析:
1.基因分型结果:
通过PCR扩增获取了TLR4基因的第3外显子,并分别筛选出了rs4986790、rs4986791和rs1927914三个单碱基多态性位点,以及TLR2、TLR3等其他TLRs基因的多个单碱基多态性位点。
2.沙门氏菌感染模型结果:
在感染组中,鸡体温升高,食欲下降,还出现了腹泻等症状,血液和组织样本中沙门氏菌数量明显增加。而对照组中,这些变化极为轻微或不存在。
3.基因表达结果:
在RT-qPCR中
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