基于荧光标记和共聚焦激光扫描显微镜技术的生物膜硝化菌群分布研究.docxVIP

基于荧光标记和共聚焦激光扫描显微镜技术的生物膜硝化菌群分布研究 好氧生物膜检测器在废水去除过程中得到了广泛应用。生物膜内硝化菌群的空间分布规律、群落结构和功能变化直接影响到反应装置中氨氮的去除效果。因此，我们了解了不同环境下生物膜中硝化菌群的空间分布和群落结构的变化规律，探讨了生物膜探测器中微生物分解污染物的机理，并进一步提高了生物膜检测器的污染物处理效率。 荧光原位杂交技术(fluorescentin situhybridization, FISH)是近年来生物学领域发展起来的一项新技术.其基本原理是,微生物细胞在脱水后,与带有荧光染料标记的寡核苷酸探针(oligonucleotide probes)在一定温度下混合,具有与探针碱基对完全互补序列的RNA随即与探针发生杂交,从而使该菌体在荧光显微镜下发出荧光.利用带有荧光标记的特异性寡核苷酸探针,与细胞内相应的靶核糖体结合,能将微生物探测、鉴定到属或种的水平.该技术目前已广泛用于遗传疾病、肿瘤研究、临床诊断以及环境检测等领域.目前,FISH技术已经成为分析生物膜中硝化菌群的分布特征的重要手段之一.通过FISH与激光共聚焦扫描显微镜(confocal laser scanning microscopy, CLSM)联用,可以考察生物膜系统中不同微生物群体之间的空间关系.Beer等人首先采用微量注射技术将荧光染料注射到生物膜表面,然