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斑马鱼视网膜感感病视蛋白的表达 斑点鱼是视觉高度发达的物种。他的视网膜与哺乳动物非常相似，有层次结构，包括神经视网膜和视网膜色素。神经视网膜有三个特征层，七个主要细胞，包括六个中枢神经和一个微芯片细胞。其中，含有三个特征性细胞，七个主要细胞，六个元组织和一个微芯片细胞。其中，有具有紫色、绿色和蓝绿色颗粒的视锥细胞和大量的视杆细胞。本研究旨在了解斑马鱼幼鱼视网膜和感光细胞的发育以及视蛋白的表达,明确利用斑马鱼进行视网膜感光细胞研究的可行性。 1 材料和方法 1.1 体外受精孵化 野生型斑马鱼购自美国俄勒冈大学,斑马鱼养殖系统从美国Aquatic Habitats公司引进。成熟的斑马鱼在28.5 ℃环境中生长,14 h亮灯、10 h黑暗循环,喂养方案按照Zebrafish Book常规进行。收集鱼卵的前一天晚上,将雄鱼和雌鱼各2~3条,放置在鱼缸内,中间用挡板将雌鱼和雄鱼隔开。第2天收集鱼卵时,移去挡板。为了确切了解胚胎的发育阶段,按照Kimmel描述根据形态标准对胚胎发育阶段进行分期。受精卵培养于孵化液(60 mg/mL海盐),28.5 ℃孵化。每天更换孵化液。用于原位杂交的胚胎从受精后24 h起,培养液中加入0.003%的苯基硫脲(phenyl thiourea, PTU),抑制黑色素形成。 1.2 实验方法 1.2.1 斑马鱼幼鱼基因rt-pcr检测 根据斑马鱼基因库视杆细胞视