柴胡根腐病抗性鉴定技术规程.docxVIP

ICS 65.020.20 B 05 河 DB13 北 省 地 方 标 准 DB 13/T —2023 柴胡根腐病抗性鉴定技术规程 2023- XX - XX 实施 2023 - XX - XX 发布 河 北 省 市场监 督 管理局 发 布 I DB13/T —2023 前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 本文件由河北省农业农村厅提出。 本文件起草单位：河北工程大学。 本文件主要起草人：李朋朋。 1 DB13/T —2023 柴胡根腐病抗性鉴定技术规程 1 范围 本文件规定了柴胡根腐病抗性鉴定技术。 本文件适用于柴胡根腐病抗性鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用 于本文件。 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3. 1 柴胡根腐病 Bupleurum chinense DC. root rot 由镰孢属Fusarium spp.（有性态为赤霉属Gibberella spp. ）的一些种所引起的柴胡根部病害。邯郸地 区柴胡根腐病病原菌为尖孢镰孢（Fusarium oxysporum），唐山地区柴胡根腐病病原菌为腐皮镰孢 （Fusarium solani）。 4 接种体制备 4. 1 病原物分离、鉴定 利用组织分离法和单胞分离技术从发病植株根的典型病斑上分离、纯化根腐病病原菌。分离物进行 形态学和分子生物学鉴定、柯赫氏法则验证及致病性测定。纯培养物4℃低温下保存备用。 4.2 接种体繁殖 将PDA平板培养的病原菌接种于经高压灭菌的高粱粒培养基（培养基制备方法：高粱粒煮30~35 min ，装入三角瓶中于121℃灭菌1h ，冷却后备用），25℃黑暗培养5~7 d后，菌丝布满高粱粒。用灭菌 水淘洗高粱粒制成孢子悬浮液，悬浮液中分生孢子浓度调至1× 106个/mL。 5 抗性鉴定圃设置 5. 1 鉴定圃 鉴定圃应具备良好的自然发病条件，周边设置保护行。 2 × 100 × 100 病情指数= DB13/T —2022 5.2 鉴定设计 鉴定材料随机排列或顺序排列，每10份鉴定材料设1组已知抗病和感病对照材料。如抗病品种济柴2 号、感病品种川北柴1号。 5.3 种植要求 鉴定小区行长3 m ，行距15~20 cm ，株距7~ 10 cm 。鉴定资源或品种时，每份鉴定材料种植2行。土 壤肥力水平和耕作管理与大田生产相同。 6 接种 6. 1 接种时间 5月中旬。 6.2 接种方法 用注射器向根部周围土壤注射浓度为1× 106个/mL的分生孢子悬浮液，每株2 mL。 6.3 接种前后的田间管理 接种前3d应进行田间浇灌或雨后进行接种，接种后3d若持续干旱，应及时进行田间浇灌，保证病 害发生所需条件，高温高湿是引起发病的主要环境条件。 7 病情调查 7. 1 调查时间 接种后40~45 d。 7.2 调查方法 鉴定每份材料的发病情况，随机调查20株柴胡植株的根部，记录病级并计算病情指数。 Σ（病害级别×该级别植株数） 最高病级×调查总株数 7.3 病情分级 田间病情分级、相对应的症状描述见表1。 表1 柴胡抗根腐病鉴定病情级别划分 病情级别 症状描述 0 根部正常、完好 1 主根发病很轻，1/4以下根腐烂 2 主根发病较轻，1/4 ~ 1/2根腐烂 3 主根发病较重，1/2 ~ 3/4根腐烂 3 DB13/T —2023 4 主根腐烂严重，3/4 以上根腐烂，甚至全株死亡 8 抗性评价 8. 1 鉴定有效性判别 若感病对照品种达到感病（S）级别（病情指数≥20.01），该批次鉴定有效。 8.2 抗性评价标准 依据鉴定材料发病程度（病情指数）确定其抗性水平，评价标准见表2。 表2 柴胡对根腐病抗性的评价标准 病情指数 抗性 0 免疫 0.01- 10.0 高抗 10.01-20.00 抗 20.01-30.00 感 30.01 高感 8.3 重复鉴定 资源材料若初次鉴定表现为免疫、高抗、抗，次年进行重复鉴定。 9 鉴定记载表格 柴胡抗根腐病鉴定结果记载表格见表3。 表3 年柴胡抗根腐病鉴定结果记载表 编号 品种/种质名称 来源 病情级别 病情指数 抗性评价 注1：鉴定地点 注2：接种病原菌名称及编号 注3：接种日期 调查日期 鉴定技术负责人（签字）：