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3、检测方法 (采样后须4小时内外理完标本) 1、用无菌吸管吸取一定稀释比例(如1∶10)的中和后混合液1. mL加到无菌空平皿中,再将冷至40℃~45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL~20mL,36℃±1℃恒温箱培养72h,计数菌落数;必要时分离致病性微生物,进行目标微生物的检测。 2、消毒液染菌量(cfu/ml)=平均每皿菌落数×10 (1)计算菌落数为0时,报告为:无菌生长 (2)0<计算菌落数≤100时,报告为:实际菌落数cfu/ml (3)计算菌落数>100时,报告为:菌落数> 100cfu/ml 3、结果判断:使用中灭菌用消毒液:无菌生长;使用中皮肤黏膜消毒液染菌量:≤10cfu/mL,其它使用中消毒液染菌量≤100cfu/mL。 注:填写报告单结果时应注明“合格”或”不合格“,或附上相应项目的标准要求参考值 当前第30页\共有44页\编于星期六\22点 五、清洁用品消毒效果监测 采样时间: 消毒后、使用前进行采样 采样方法:布巾、地巾等物品可用无菌的方法剪取 1cm×3cm,直接投入 5ml 含相应中和剂的无菌生理盐水中,及时送检。 检测方法:将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打 80 次,取采样液检测致病菌。 结果判断和报告:未检出致病菌为消毒合格。 致病菌的检测:当怀疑被某致病菌污染时,或怀疑医院感染与某致病菌有关时,致病菌的检测依据污染情况进行相应指标菌的检测。检测方法参考相关标准。 当前第31页\共有44页\编于星期六\22点 如何正确对医院环境进行监测和报告结果? 一、物体表面消毒效果的监测 二、手卫生效果的监测 三、空气消毒效果的监测 四、使用中消毒液染菌量测定 五、清洁用品消毒效果监测 六、内镜的消毒效果监测 当前第1页\共有44页\编于星期六\22点 环境类别 范 围 细菌数量标准 空气 物体表面 cfu/cm2 医护人员手 cfu/cm2 Ⅰ类 层流洁净手术室,层流洁净病房。 ≤4 cfu/φ9cm平皿·30min ≤5 ≤5 Ⅱ类 非洁净(普通)手术室;产房;导管室;血液病病区、烧伤病区等保护性隔离病区;重症监护病区;新生儿室等。 ≤4 cfu/φ9cm平皿·15min ≤5 ≤5 Ⅲ类 母婴同室;消毒供应中心的检查包装灭菌区和无菌物品存放区;血液透析中心(室);其他普通住院病区等。 ≤4 cfu/φ9cm平皿·5min ≤10 ≤10 Ⅳ类 普通门(急)诊及其检查、治疗(注射、换药等)室;感染性疾病科门诊和病区。 ≤4 cfu/φ9cm平皿·5min ≤10 ≤10 当前第2页\共有44页\编于星期六\22点 一、物体表面消毒效果的监测 采样时间: 在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样 。 采样方法: 用5cm×5cm灭菌规格板放在被检物体表面,用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)或生理盐水采样液的棉拭子1支,在规格板内横竖往返各涂抹5次,并随之转动棉拭子,连续采样4个规格板面积,被采表面<100cm2,取全部表面;被采表面≥100cm2,取100cm2。 剪去或用酒精灯烧去手接触部分,将棉拭子放入装有10ml无菌检验用生理盐水洗脱液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体表面采样。采样物体表面有消毒剂残留时,采样液应含相应中和剂。 当前第3页\共有44页\编于星期六\22点 病房电脑键盘的细菌 江西省肿瘤医院微生物室 当前第4页\共有44页\编于星期六\22点 上海中山医院ICU病房 当前第5页\共有44页\编于星期六\22点 检测方法: 充分振荡采样管后,取不同稀释倍数的洗脱液1. ml接种营养琼平皿,将冷至40℃~45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL~20mL,35℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数。怀疑与医院感染暴发有关时,进行目标微生物的检测,加种羊血哥仑比亚琼脂平皿和麦康凯平皿等。 结果计算: 物体表面菌落总数(cfu/cm2) = (平皿菌落数×10)÷100 =平皿菌落数÷10 或 = (平皿菌落数×10)÷实际采样面积 0≤计算的数值<1 时, 报告为:物表细菌菌落数 <1 cfu/cm2 1 ≤计算的数值≤10时, 报告为:物表细菌菌落数: 实际计算值 cfu/cm2 计算的数值 >10时,报告为: 物表细菌菌落数>10 cfu/cm2 如是灭菌物品物表无细菌生长时,则报告:无菌生长 小型物体表面的结果计算,用 cfu/件表示: =
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