慢性粒细胞白血病中miR-146a低表达的调控机制研究的中期报告.docx

慢性粒细胞白血病中miR-146a低表达的调控机制研究的中期报告 慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia，CML）是一种由于BCR-ABL融合蛋白的慢性增殖引起的血液系统肿瘤。miRNAs已被证明在CML的发生和发展中发挥着重要的作用。 miR-146a是一种广泛表达的miRNA，与多种炎症和免疫反应的调节有关。miR-146a在CML细胞中被发现低表达，并且其低表达与CML的发展和转化有关。为了研究miR-146a低表达的调控机制，我们进行了以下的中期研究报告。 实验设计包括以下几个步骤： 1. 病例选择和组织样本收集：选择10例CML患者和10例正常人进行对照，收集其骨髓细胞样本。 2. RNA提取：从骨髓细胞中提取总RNA，使用qRT-PCR检测miR-146a的表达水平。 3. Western blot：检测miR-146a可能调节的蛋白质水平，包括TRAF6、IRAK1和NF-κB等。 4. 细胞培养：使用CML细胞系K562和正常骨髓细胞系HS-5，检测miR-146a对这些细胞的影响以及与TRAF6、IRAK1和NF-κB等的关系。 5. Dual-luciferase reporter assay：构建miR-146a靶向的TRAF6、IRAK1和NF-κB等3UTR序列，以及与miR-146a配对的mut序列，进行双荧光素酶报告实验，验证miR-146a对这些靶向的调节作用。 目前的实验结果显示miR-146a在CML患者中表达水平比正常人低，同时TRAF6、IRAK1和NF-κB等相关蛋白质的表达水平也相应升高。与CML细胞系K562相比，正常骨髓细胞系HS-5中miR-146a表达水平更高。 接下来，我们将继续进行miR-146a的调控机制研究，包括其靶向的TRAF6、IRAK1和NF-κB等的调控效应和机制，以及miR-146a对CML细胞增殖和凋亡的影响等方面的实验验证。