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脉管通胶囊对血栓闭塞性脉管炎大鼠模型的治疗作用 血栓形成性脉管炎（tao）是一种发育于年轻男性四肢远端中小动脉炎的节段性、炎症和梗死疾病的类型。临床发现自制药脉管通胶囊对TAO确有较好的疗效,为了探讨该药作用机理,本文从体征变化、病理切片血栓分级、血液流变学及血浆TXB2、6-K-PGF1α等方面观察了该胶囊对血栓闭塞性脉管炎大鼠模型的影响,并初步探讨其作用机理。现将结果报告如下。 1 材料和方法 1.1 材料表面 1.1.1 动物 雄性SD大白鼠72只,7月龄,体重(302±17)g,由湖南中医学院实验动物中心提供。 1.1.2 试剂与仪器 脉管通胶囊(由当归、鸡血藤、丹参、黄芪、赤芍、郁金、牡蛎、皂角刺等14味药物组成,湖南中医学院第一附属医院药剂科制备,批号:980806,0.5 g?/粒)、复方丹参片(广东万盛花城制药厂生产,0.3 g?/片)、月桂酸(上海化学试剂采购供应站分装厂提供)、ZT快速医用胶(浙江兴华医疗制品厂)、血栓素B2、6-酮-前列腺素F1α放免试剂盒(购自苏州医学院血栓研究所,批号:0723-9702)。 1.2 大鼠模型的制备 72只大鼠随机分为假手术组、病理模型组(简称模型组)、复方丹参片对照组(简称丹参片组)、脉管通胶囊低剂量组(简称脉通低组)、中剂量组(简称脉通中组)和高剂量组(简称脉通高组)共6组,每组12只。参照文献方法制作大鼠TAO模型:氯铵酮100 mg?/kg腹腔注射麻醉,游离股动脉,夹闭阻断血流,假手术组注入0.2 mL生理盐水,其余大鼠注入0.2 mL月桂酸,ZT快速医用胶封闭针孔。造模3 d后假手术组给予蒸馏水灌胃,丹参片组灌胃复方丹参片悬液,脉管通3剂量组灌胃脉管通胶囊悬液,复方丹参片组0.243 g?/(kg·d),脉管通胶囊低、中、高剂量组分别为0.405 g?/(kg·d)、0.81 g?/(kg·d)、1.92 g?/(kg·d),低剂量为临床等效剂量。各组均按1 mL?/ 200 g体重剂量灌胃,连续30 d。 1.3 指标检测 1.3.1 病变程度及范围 观察大鼠患肢皮肤温度、颜色、动脉搏动、患肢肿胀程度、坏疽和木乃伊化的病变程度和范围。参照王军等采用的分级标准分级,Ⅰ级:病变局限于趾甲部;Ⅱ级:病变局限于趾部;Ⅲ级:病变局限于足爪部;Ⅳ级:病变局限于膝关节以下;Ⅴ级:病变发展到膝关节以上。 1.3.2 血栓分级标准 取大鼠右下肢,10%福尔马林液固定3 d后用10%硝酸脱钙,足趾、踝关节上、下及股部4个部位横断切片,HE染色,对血栓进行分级,0级:无血栓;Ⅰ级:1个血栓;Ⅱ级:2～3个血栓;Ⅲ级:4个以上血栓。 1.3.3 血液流变量检查 包括全血粘度、血浆比粘度、红细胞压积、红细胞电泳时间,由湖南中医学院第一附属医院协助测定。 1.3.4 血浆txb2、6-k-pgf1检测 放射免疫法测定。 1.4 统计方法 计数等级资料采用秩和检验,计量资料采用单因素方差分析处理。 2 结果 2.1 儿童性动物手术后反应 大鼠经股动脉注入月桂酸造模后,约5 min后开始出现患肢足爪部变苍白继而青紫,皮肤温度降低,动脉搏动减弱或消失,次日受累的足趾变黑,并逐渐向上发展,形成坏疽和木乃伊化。少数动物手术后表现为患肢疼痛、跛行和曳行现象。2周内多数大鼠出现患侧坏疽部分脱落,模型组的病变最严重,脉通中、高剂量组的病变最轻,与丹参片组比较有显著性差异(P0.05),而假手术组未出现病变表现,各组与假手术组比较均具有非常显著性差异(P0.01),见表1。 2.2 血栓形成状态 假手术组手术区组织均有轻微粘连,有轻度炎细胞浸润,以淋巴细胞为主,但股动脉均呈通畅状态,内膜光滑,血管内无血栓形成;经造模后TAO模型大鼠股动脉内均有不同程度的血栓形成,脉通3个剂量组与丹参片组大鼠的血栓数量均明显减少,程度显著降低,其中脉通中、高剂量组未出现血栓机化现象,血栓再通次数增多,结果见表2。 2.3 各组小鼠血清胞技术指标比较,表现为 假手术组与模型组相比,部分血液流变值差异有显著性(P0.05,P0.01);实验组与模型组比较,全血比粘度、血浆比粘度明显降低(P0.05),但红细胞压积、红细胞电泳时间变化不明显;脉通高组与丹参片组比较,全血比粘度低切值明显降低,差异具有显著性意义(P0.05),结果见表3。 2.4 各组患者6-k-pgf1、txb2、t/k比值对 模型组与假手术组比较,血浆6-K-PGF1α含量降低,TXB2、T/K比值明显升高(P0.01);脉通各剂量组与模型组相比,6-K-PGF1α含量明显升高,TXB2、T/K比值降低(P0.01),与丹参片组比较,T/K比值降低(P0.01);丹参片组与模型组比较,T/K比值降低(P0.01),结果见表4。 3 脉管通胶囊对患者血流变性