影响酶促反应速度的因素生化实验.docVIP

实验二　影响酶促反应速度的因素 　　【目的】 　　观察温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。 　　【原理】 唾液淀粉酶催化淀粉水解，生成一系列水解产物，即糊精、麦芽糖和葡萄糖等。淀粉及其水解产物遇碘会呈现不同的颜色。 在不同温度，不同PH值下，唾液淀粉酶活性不同，催化淀粉水解程度不一，生成的产物也就不同。此外，激活剂、抑制剂也能影响淀粉酶活性，影响淀粉的水解。因此可根据在不同反应条件下，溶液加碘呈现的不同颜色来判断淀粉的水解程度，从而验证了温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。 　　【操作】 1. 温度对酶促反应速度的影响 取3支试管，编号，按下表操作： 试管号加入物（滴） 1 2 3 pH6.8缓冲液 20 20 20 1%淀粉溶液 10 10 10 置37℃ 置沸水浴5分钟 置冰水浴5分钟 稀释唾液 5 5 5 置37℃ 置沸水浴10分钟 置冰水浴10分钟 碘液 1 1 1 现象 2. PH对酶促反应速度的影响 取3支试管，编号，按下表操作： 试管号加入物（滴） 1 2 3 pH3.0缓冲液 20 － － pH6.8缓冲液 － 20 － pH8.0缓冲液 － － 20 1%淀粉溶液 10 10 10 稀释唾液 5 5 5 摇匀，置37℃ 现象 3．激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响 取4支试管，编号，按下表操作