裂殖壶菌油脂水酶法提取工艺优化及其脂肪酸组成分析.pdf

2018年2月 中国粮油学报 Vo1．33．No．2 第 33卷第 2期 Journa1oftheChineseCerealsandOilsAssociation Feb．2018 裂殖壶菌油脂水酶法提取工艺优化 及其脂肪酸组成分析 徐 华 张 茹 刘连亮 张进杰 杨文鸽 楼乔明 (宁波大学海洋学院，宁波 315211) 摘 要 采用水酶法对裂殖壶菌油脂的提取工艺进行研究，通过单因素和正交实验优化提取工艺条件， 并对裂殖壶菌油脂的脂肪酸组成进行分析。实验结果表明，水酶法提取裂殖壶菌油脂的最佳工艺条件：复合 酶配比2：8(纤维素酶 ：中性蛋 白酶，U ：U)，液料比4mL／g，加酶量 2500U／g，酶解温度 55℃，酶解时间4 h；在此优化条件下，裂殖壶茵油脂提取率为 82．47％。裂殖壶菌油脂脂肪酸以C14：0、C16：0、C22：5n一6 和C22：6n一3为主，其脂肪酸组成简单，且C22：6n一3质量分数高达 32．65％，表明裂殖壶菌油脂具有很高 的营养价值和功能性油脂的开发潜力，可作为C22：6n一3的重要食药来源。 关键词 裂殖壶茵 水酶法 油脂提取 脂肪酸 中图分类号：TS251．9 文献标识码 ：A 文章编号：1003—0174(2018)02—0044—06 裂殖壶菌 (Schizochytriumsp．)，又名裂壶藻，其 数为44．63％。菠萝蛋 白酶 (5O万U／g)、木瓜蛋 白 属于真菌门(Eumycota)、网粘菌纲 (Labyrinthulomy— 酶 (80万 U／g)、酸性蛋 白酶 (80万 U／g)、碱性蛋 白 cetes)、破囊壶菌 目(Thraustochytriales)、破囊壶菌科 酶(20万U／g)、中性蛋 白酶 (20万U／g)、纤维素酶 (Thraustochytriaceae)的一类类藻的海洋微生物 J。 (5万U／g)：均为食品级试剂酶，江苏锐阳生物科技 裂殖壶菌的菌体脂质含量丰富，且 以甘油三酯为主， 有限公司；37种脂肪酸甲酯混合标准品：美 国Sigma DHA占总脂肪酸含量的30％ ～40％，被认为是一种 公司；甲醇、氯仿、正己烷：均为分析纯，天津市科密 理想的DHA新生资源。目前 ，从裂殖壶菌中提取制 欧化学试剂公司。 备高纯度 DHA 已日益成为 国内外海洋生物技术的 1．2 仪器和设备 研究热点 。 6890N型气相色谱仪、5973型质谱仪：美国Agi— 水酶法是近年来广泛研究的一种油脂提取新技 lent公司；Laborota4000efficient旋转蒸发器 ：德国海 术，是将生物酶制剂应用于油脂分离的方法，通过酶 道尔夫公司；THZ一82型水浴恒温振荡器 ：常州国华 制剂对油料底物的降解作用，提高油脂出油率；该方 电器有限公司。 法具有选择性降解 、副产物少、出油率高、油质好等 1．3 实验方法 优点 。』。因此 ，本实验采用水酶法对裂殖壶菌油脂 1．3．1 水酶法提取的工艺流程 裂殖壶菌干粉一加水一微波预处理一酶解一正 的提取工艺进行研究和优化，以期为裂殖壶菌油脂 己烷萃取一减压浓缩一油脂 提取及后续工业化应用提供参考。 提取工艺要点：取 2g裂殖壶菌干粉 ，按一定液 料 比加入蒸馏水，并微波 5min(微波频率 2450 1 材料与方法 MHz，输 出功率 450W)；待样品冷却至室温，加入一 1．1 材料与试剂