指示菌的检验—乳酸菌的检验（食品微生物检验技术课件）.pptx

食品中乳酸菌检验 目录/Contents1 材料、试剂及设备操作程序结果判定食品商业无菌的检验23 01材料、试剂及设备设备和材料恒温培养箱；冰箱；均质器及无菌均质袋、均质杯或灭菌乳钵；天平；无菌试管；无菌吸管或微量移液器及吸头；无菌锥形瓶 01材料、试剂及设备培养基和试剂 MRS培养基及莫匹罗星锂盐改良MRS培养基；MC培养基；0.5%蔗糖发酵管；0.5%纤维二糖发酵管；0.5%麦芽糖发酵管；0.5%甘露醇发酵管；0.5%水杨苷发酵管；.5%山梨醇发酵管；0.5%乳糖发酵管；七叶苷发酵管；革兰氏染色液；莫匹罗星锂盐 02操作程序 02操作程序样品准备 冷冻样品可先使其在2℃～5℃条件下解冻固体和半固体食品：制成1：10样品匀液液体样品：制成1：10的样品匀液 02操作程序乳酸菌计数 乳酸菌总数根据待检样品活菌总数的估计，选择2个～3个连续的适宜稀释度，每个稀释度吸取0.1 mL样品匀液分别置于2个MRS琮脂平板，使用L形棒进行表面涂布。36℃土1℃，厌氧培养48℃土2 h后计数平板上的所有菌落数。从样品稀释到平板涂布要求在15min内完成 02操作程序嗜热链球菌计数 根据待检样品嗜热链球菌活菌数的估计，选择2个～3个连续的适宜稀释度，每个稀释度吸取0.1 mL样品匀液分别置于2个MC琼脂平板，使用L形棒进行表面涂布。36℃土10C，需氧培养48 h土2 h后计数。嗜热链球菌在MC琼脂平板上的菌落特征为：菌落中等偏小，边缘整齐光滑的红色菌落，直径2 mm土lmm，菌落背面为粉红色。15 min内完成 02操作程序乳杆菌计数 乳酸菌总数结果减去双歧杆菌与嗜热链球菌计数结果之和即得乳杆菌计数 02操作程序菌落计数 以菌落形成单位表示选取菌落数在30 CFU～300 CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数 02操作程序计数结果的表述 若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g （mL）中菌落总数结果若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按以下公式计算 02操作程序菌落数的报告 菌落数小于100 CFU时，按“四舍五入”原则，以整数报告菌落数大于或等于100 CFU时，第3位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2位数字，后面用0代替位数；也可用10的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告 03结果报告 根据菌落计数结果出具报告，报告单位以CFU/g （mL）表示