PRRSV Nsp7间接ELISA检测方法的建立及其单克隆抗体的制备的中期报告.docxVIP

PRRSV Nsp7间接ELISA检测方法的建立及其单克隆抗体的制备的中期报告 本研究旨在建立一种可靠的PRRSV Nsp7间接ELISA检测方法，并制备相应的单克隆抗体。目前已完成了该研究的中期进展，并报告如下： 1. PRRSV Nsp7间接ELISA检测方法的建立 在提取和纯化PRRSV Nsp7蛋白的基础上，根据ELISA检测的原理设计了间接ELISA实验步骤，并进行了实验优化。其中包括： （1）免疫ELISA板的涂覆条件（涂覆浓度、涂覆时间和涂覆温度）的优化 （2）Nsp7抗原的最佳加药浓度和孵育时间的确定 （3）抗体稀释倍数和孵育条件的确定 （4）显色反应的优化 经过实验优化，我们成功建立了PRRSV Nsp7间接ELISA检测方法，并对不同来源的猪血清样本进行了检测。结果表明，该检测方法具有较高的敏感性和特异性，可用于PRRSV病毒的快速检测。 2. PRRSV Nsp7单克隆抗体的制备 根据PRRSV Nsp7的氨基酸序列设计和合成了Nsp7的多肽抗原，并用于驴子免疫制备单克隆抗体。目前已完成了全套的制备工作，包括驴子免疫、混合细胞瘤的制备和筛选等步骤。经过ELISA和Western blot等方法的鉴定，已获得了1株稳定的Nsp7单克隆抗体，并进行了小规模扩充。 下一步，我们将继续评估PRRSV Nsp7间接ELISA检测方法的准确性和稳定性，并进行进一步的验证实验。同时，还将进一步扩充Nsp7单克隆抗体的规模，并基于此制备出更多的检测试剂，以满足不同的应用需求。