犬瘟热病毒F蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及抗原捕获ELISA方法的建立的中期报告.docxVIP

犬瘟热病毒F蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及抗原捕获ELISA方法的建立的中期报告 本研究旨在制备针对犬瘟热病毒(F型)的单克隆抗体，并建立抗原捕获ELISA方法进行检测。 制备单克隆抗体的步骤包括：1）制备犬瘟热病毒F蛋白多肽抗原；2）制备小鼠免疫原液；3）融合小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞；4）筛选和扩增阳性杂交瘤克隆；5）纯化单克隆抗体。 目前已完成犬瘟热病毒F蛋白多肽抗原和小鼠免疫原液的制备，正在进行融合和筛选克隆的过程。 同时，本研究还建立了抗原捕获ELISA的方法。首先，将制备好的多肽抗原与96孔ELISA板上的底物钉合成捕获抗原，再加入样品和单克隆抗体，与捕获抗原发生反应，最后用HRP标记的二抗反应，并在底物的作用下发光检测。实验结果显示，该方法能够检测到犬血清中的犬瘟热病毒F型抗体，且具有良好的特异性和灵敏度。 总之，本研究已完成了制备犬瘟热病毒F蛋白多肽抗原和小鼠免疫原液的过程，并正在进行克隆筛选和单克隆抗体的纯化过程。同时，建立了一种可靠的抗原捕获ELISA方法，为进一步开展犬瘟热的研究提供了重要的技术支持。