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肝癌组织hugl-1异常剪接体的功能的研究的中期报告 中期报告： 肝癌是一种恶性肿瘤，其发生和发展涉及到多个基因的异常表达和调控。我们的研究聚焦于肝癌组织中一个发现较为特殊的异常剪接体：hugl-1。我们发现，在肝癌组织中，hugl-1的可变外显子V3被更多地剪接进入成熟mRNA，而正常肝组织则更倾向于剪接V1或V2。这种异常剪接形式可能与肝癌的发生和发展有关。 在前期研究中，我们构建了包含V1、V2和V3可变外显子的hugl-1重组质粒，纯化了相应的重组蛋白，并在肝癌细胞株中表达了这些蛋白。初步研究结果表明，hugl-1 V3 异常剪接体能够促进肝癌细胞的增殖和迁移，并且参与了p53通路及细胞凋亡的调控。 为了深入了解hugl-1 V3 异常剪接体的调控机制和功能，在这个阶段，我们利用CRISPR-Cas9技术，对肝癌细胞株中的hugl-1基因进行突变实验。我们设计了两个sgRNA，使hugl-1基因中的exon V3被全长删除。通过Western blot和实时定量PCR等技术，我们发现exon V3的缺失使得hugl-1表达受到显著影响，而剪接进入mRNA的V1和V2可变外显子的比例增加。 接下来，我们将进一步深入研究hugl-1 V3 异常剪接体参与调控肝癌细胞增殖和迁移的分子机制，并探索是否存在与hugl-1 V3 异常剪接体有关的治疗策略。