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产Serpin双杆菌菌株筛选与serpin缺失株的构建的中期报告
该实验旨在筛选产Serpin双杆菌菌株,并构建serpin缺失株,以研究Serpin对菌株生长和发育的影响。以下为该实验的中期报告:
1. 筛选产Serpin双杆菌菌株
我们从环境样品中分离出10个双杆菌菌株,并进行PCR检测和测序,发现其中6个菌株中存在Serpin基因。通过Western blot和ELISA检测,我们确认了其中三个菌株(命名为S1、S2和S3)表现出较高的Serpin表达水平,因此选定它们作为产Serpin菌株。
2. 构建serpin基因缺失株
采用基因编辑技术CRISPR-Cas9,将目标sgRNA序列插入pCas9-sgRNA质粒中,转化进Serpin菌株S1、S2和S3中,并筛选出Serpin缺失株。初步结果显示,在S3菌株上成功构建了Serpin缺失株,但在S1和S2菌株上未获得Serpin缺失株。
下一步,我们将对S3的Serpin缺失株进行进一步鉴定和验证,并继续优化Serpin基因缺失技术,以在S1和S2菌株上实现Serpin基因缺失。
总结:本实验中,我们成功筛选出了3个产Serpin双杆菌菌株,并在其中构建了一个Serpin基因缺失株。该实验的下一步工作将重点关注Serpin缺失株的性状分析和鉴定,以及Serpin基因缺失技术的优化和应用。
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