海洋产电菌讲解.ppt

第一页，共十八页，2022年，8月28日 研究海洋产电菌 Shewanella marisflavi EP1脱色特性的实验 实验原理 1 实验材料 2 实验方法 3 实验结果与讨论 4 第二页，共十八页，2022年，8月28日 产电菌（嗜阳极细菌） 具有胞外电子代谢途径，能将代谢产生的一部分电子传递给位于细胞外的最终电子受体。 功能： 可用于微生物电池产电 在染料的降解脱色等方面有某些优势 第三页，共十八页，2022年，8月28日 Geobacter属： 严格厌氧菌(主要以乙酸为碳源) Shewanella属：兼性厌氧菌（碳源利用比较广） 产电菌 第四页，共十八页，2022年，8月28日 Shewanella广泛分布于沉积物液固分界面等氧化还原电位变化比较频繁的微型生境中。这类微生物易获得和培养，并在偶氮染料废水的解方面有重要的应用价值。 But，目前在国内此类微生物的菌种资源还比较少，来自于海洋的能产电的Shewanella菌更少。 Shewanella 第五页，共十八页，2022年，8月28日 实验材料 菌种： 海洋产电菌 Shewanella marisflavi EP1 染料 : 单偶氮染料丽春红2R 双偶氮染料刚果红 蒽醌类染料活性艳蓝KN-R 三苯基甲烷染料孔雀绿 直接染料直接黄（DY) 培养基: 改进的2216E（1L):(蛋白胨5g ，酵母膏1g， 海水1000ml pH7.0） 脱色培养基（RM） 第六页，共十八页，2022年，8月28日 实验方法 EP1对不同燃料的脱色能力初步确定 150ml血清瓶：装入2216E培养基100ml， 接种2%过夜培养的EP1菌， 通入高纯氮气（除氧） 将其密封恒温20度至瓶内颜色基本不变 测始末染料特征吸收峰的吸光度，对比标准曲线 净脱色染料质量 第一步 第七页，共十八页，2022年，8月28日 实验方法 EP1细胞干重测量方法： 离心管 105℃烘干，m （约2h） 取不同OD 浓度细菌培养液V 离心（8000r/min，10min） 弃上清液 去离子水淋洗菌体 离心（得沉淀） 测恒重，m 1 600 2 单位菌浊度单位体积的菌体细胞干重：（m –m ）/（V*OD ） 2 1 600 每个样品取3个平行样，得OD600与菌体细胞干重的关系曲线 第二步 第八页，共十八页，2022年，8月28日 实验方法 脱色影响因素研究： 选择温度、pH、碳源以及NaCl作为考虑因素 第三、四步 脱色率的计算方法： 实验组：去除菌体的反应液 对照组：未接菌的染料培养液 取实验组中的上清液在200nm-800nm进行紫外-可见光谱扫描，根据XP2R最大吸收波长507nm处吸光度，按以下公式计算其脱色能力：r（%）=(A0-At)/A0 *100% （A0、At指初始时刻和t时刻后上清液吸光度；r为脱色率） 第九页，共十八页，2022年，8月28日 实验结果与讨论 EP1的广谱脱色特征 2nd 3rd 4th pH和温度对脱色性能的影响 不同碳源对脱色性能的影响 Nacl浓度对脱色性能的影响 1st 5th 脱色机理分析 第十页，共十八页，2022年，8月28日 EP1的广谱脱色特征 双偶染料类 RB19 MG XP2R 925 363 蒽醌类 三苯基甲烷类 单偶氮类 CR 100 156 第十一页，共十八页，2022年，8月28日 pH和温度对脱色性能的影响 第十二页，共十八页，2022年，8月28日 不同碳源对脱色性能的影响 第十三页，共十八页，2022年，8月28日