草本葡萄酒多糖测定.pdfVIP

ICS 67. 160. 10 CCS X 62 TB 准 标 团 体 T/ NAIA XXX-2023 草本葡萄酒多糖含量的测定 乙醇沉淀－苯酚硫酸法 Determination of polyacrylamide content in herbal wines Alcohol-phenol-sulfuric acid method 2023-:XX-XX 发布 2023-:XX-XX 实施 宁夏化学分析测试协会 发布 前 言 本文件按照 GB/T 1. 1-2020 《标准化工作导则第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 本文件由北方民族大学生物科学与工程学院提出。 本文件由宁夏化学分析测试协会归口。 本文件起草单位：北方民族大学。 本标准主要起草人：朱娟娟、郭妹彤、马海军。 本文件为首次发布。 草本葡萄酒多糖含量的测定乙醇沉淀－苯酚硫酸法 1 范围 本文件规定了乙醇沉淀－苯酚硫酸法测定草本葡萄酒多糖含量的分析方法。 本文件适用千草本葡萄酒中多糖含量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对千本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用千本 文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用千本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 (ISO 3696: 1987, MOD) 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 利用低温条件下多糖在乙醇溶液中聚合形成微颗粒沉淀，再在硫酸的作用下先水解成单糖，并 迅速脱水生成糖醉衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，用分光光度法于490 nm 波长处测定期多 糖含歌。 5 试剂 本方法所用试剂为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的三级水。 5. 1 浓硫酸。 5.2 葡萄糖标准溶液 CO. 1 g/L) : 准确称取 105 °C 千燥恒重的D－无水葡萄糖 0. 1 g （精确到 0.000 1 g) ，加蒸馈水溶解，并定容至 1 000 mL。 5.3 苯酚溶液： 苯酚使用重蒸苯酚，称取重蒸苯酚10 g, 加蒸馈水溶解，并定容至 150 ml ，随后保存千棕色瓶中备用。 6 测定步骤 6. 1 标准曲线的绘制： 准确吸取 0. 1 g/L 葡萄糖标准溶液 0. 1 mL、 0.2 mL、 0.4 mL、 0.6 mL、 0.8 mL、 1. 0 mL 分置千 25 mL 具塞试管中，各试管中添加蒸馈水至2. OmL，再添加 1. 0 mL 苯酚溶液，迅速加入5. OmL 浓硫酸摇匀后放置 5 min, 置于 100 °C 水浴中加热 15 min, 取出冷却至室温另以水 2 mL 加苯酚和浓硫酸，同上操作为空 白对照，千 490 run 处测定吸光度，绘制标准曲线。 6.2 样品处理及测定： 分别取 25 mL 草本葡萄酒千 50 mL 瓷玵涡中在 60 °C 下挥发至近干， 10 mL 水溶解转移至 50 mL 离心管中加入 40 mL 无水乙醇，混匀后 4 °C 沉淀 24 h, 12 000 r/min 离心 10 min, 除去上清液， 保留沉淀，随后加入等体积 80% 乙醇溶液 12 000 r/min 离心 5 min, 去离子水溶解后定容至 25 mL 待测。 准确吸取适量样品溶