纤维素降解真菌的筛选及其纤维素酶基因的克隆与表达的中期报告.docxVIP

纤维素降解真菌的筛选及其纤维素酶基因的克隆与表达的中期报告 此中期报告旨在介绍纤维素降解真菌的筛选、纤维素酶基因的克隆和表达进展情况。 1. 纤维素降解真菌的筛选 通过从自然环境（例如林场、农田、湖泊等地）和工业废弃物（如果渣、甘蔗渣、木材废弃物等）样品中采集微生物，我们筛选了很多潜在的纤维素降解真菌。其中，经过初步筛选和鉴定，我们选择了10株具有较强纤维素降解能力的真菌。 2. 纤维素酶基因的克隆 为了探究这些真菌纤维素降解机制，我们选择了其中4株真菌以其基因组DNA为模板进行PCR扩增。选择的四个基因包括：β-葡萄糖苷酶（BGL）、微晶纤维素酶（CBH）、纤维素水解酶（EG）和β-葡萄糖聚糖酶（BG）。通过PCR扩增得到了预期大小的基因片段，证明了这些真菌基因组中具有从纤维素和淀粉多糖代谢途径中选择的纤维素酶基因。 3. 纤维素酶基因的表达 我们通过将所克隆的纤维素酶基因插入表达载体pPIC9K，然后将其转化到毕赤酵母（Pichia pastoris）中，成功表达了其中的两个基因（BGL和CBH）。这些表达蛋白已经获得了纯化和活性检测。 总之，我们已经成功地筛选了很多具有潜在纤维素降解能力的真菌，并进行了纤维素酶基因的克隆和表达。我们希望这些研究将有助于深入了解纤维素降解的机制，并为实现高效的纤维素降解和生物质能源利用提供理论基础和技术支持。