二色补血草几丁质酶基因chi31和chi32原核表达及重组酶分析的中期报告.docxVIP

二色补血草几丁质酶基因chi31和chi32原核表达及重组酶分析的中期报告 摘要： 本中期报告主要介绍了对二色补血草几丁质酶基因chi31和chi32进行原核表达及重组酶分析的研究进展。通过PCR扩增获得了chi31和chi32基因的DNA片段，将其克隆至pET28a(+)载体中，经过转化大肠杆菌BL21 (DE3)获得表达重组酶的菌株。通过SDS鉴定获得表达的重组酶的分子量与预期的一致，实现了chi31和chi32基因的原核表达。进一步进行重组酶的纯化及活性鉴定，实验结果表明，经过Ni-NTA亲和层析及离子交换层析，得到了纯度较高、活性较好的重组酶。本研究为后续进一步研究二色补血草几丁质酶基因的分子功能及应用提供了基础条件。 关键词：二色补血草；几丁质酶基因；原核表达；重组酶分析 Abstract: This midterm report mainly introduced the research progress of prokaryotic expression and recombinant enzyme analysis of chitinase genes chi31 and chi32 in Hedyotis biflora. The DNA fragments of chi31 and chi32 were obtained by PCR amplificatio