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- 2023-09-16 发布于上海
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小麦TaSPX-MFS基因的克隆及其在小偃54高温诱导抗条锈性中的功能分析的中期报告
本研究旨在克隆小麦TaSPX-MFS基因并进一步探究其在小麦高温诱导抗条锈性中的作用。
一、 TaSPX-MFS基因的克隆
1.1 基因序列分析
通过对小麦基因组数据库中SPX-MFS基因家族的基因序列进行比对和分析,得到TaSPX-MFS基因的序列信息。该基因包含1341个碱基,编码446个氨基酸,分子量约为49.9kDa,等电点为6.41。
1.2 基因克隆
采用RT-PCR方法从小麦叶片中成功克隆出TaSPX-MFS基因。PCR产物经测序验证,与目标基因序列一致。进一步分析表明,该基因具有保守的SPX和MFS结构域。
二、 TaSPX-MFS基因在小麦高温诱导抗条锈性中的功能分析
2.1 温度处理
将小麦品种小偃54分为两组,一组在26℃/22℃(日/夜)的恒温条件下生长,称为CK组;另一组在37℃/28℃(日/夜)的高温条件下生长,称为HT组。两组小麦分别在高温处理中的第0天、第1天、第2天和第3天进行取样。
2.2 表达谱分析
通过实时荧光定量PCR技术,分析了TaSPX-MFS基因在HT和CK组小麦中的表达差异。结果表明,TaSPX-MFS基因在HT组小麦中的表达显著高于CK组小麦,尤其是在第2天和第3天,表达量分别是CK组的3.5倍和6.2倍。
2.3 病原菌感染实验
选取抗条锈病的
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