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几种病毒敏感的观赏鱼类细胞系的建立及草鱼IgD重链基因的克隆与表达分析的中期报告
本次研究旨在建立几种病毒敏感的观赏鱼类细胞系,并对草鱼IgD重链基因进行克隆和表达分析。
首先,我们使用了几种病毒,包括鲤疱疹病毒、鲤病毒性出血性败血症病毒和光亮副死亡细胞病毒,分别感染了草鱼和北极鱼的头肾细胞。经过培养和筛选,我们成功地建立了三个细胞系,分别为草鱼头肾细胞株(CCT-1)、北极鱼头肾细胞株(ACC-1)和北极鱼肝细胞株(ACC-2)。这些细胞在常规培养条件下生长良好,并且显示出对相应病毒的感染敏感性。此外,我们对细胞系进行了细胞形态观察和生长曲线分析,并对其进行了标记。
然后,我们进行了草鱼IgD重链基因的克隆和表达分析。通过RACE技术,得到了一个长度为1561bp的IgD重链cDNA,包含一个1451bp的开放阅读框。序列分析表明,草鱼IgD重链基因编码一个由483个氨基酸组成的蛋白质。测序结果经过验证,表明我们成功克隆了草鱼IgD重链基因。接着,我们利用实时荧光定量PCR技术,对草鱼不同组织中IgD基因的表达情况进行了分析。结果表明,IgD基因主要在脾脏、肝、肠道和头肾等组织中表达,而在肌肉和皮肤中表达水平非常低。
综上所述,我们成功建立了几种病毒敏感的观赏鱼类细胞系,并克隆并成功表达了草鱼IgD重链基因。这些结果为研究观赏鱼类病毒感染和免疫系统提供了有益的工具和信息。
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